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淋球菌抗体(IgG\IgM)
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保存温度: 2-8℃
封板膜: 2片(48)/2片(96)
产品用途:科研 实验
检测方法:法
标 本:血清
规 格:24T/48T
联系电话:021-60517348,18221656311
公司网址:http://www.shhykit.com/
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中水平。用纯化的其抗体包被微孔板,制成固相抗体。往包被单抗的微孔中依次加入本产品,再与HRP标记的其抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中产品的浓度。
试剂盒组成:
1、30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2、酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶
3、酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4、样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5、显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6、显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求 :
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
120 ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
60 ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
30 ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
15 ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
7.5 ng/L1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
4.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
5.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
1.准备试剂,样品和标准品
2.加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟
3.洗板5次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟
4.洗板5次,加入显色液A、B,37℃反应10分钟
5.加入终止液
6.15分钟之内度OD值
7.计算
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