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小鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒说明书
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详细内容
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠Toll样受体4(TLR4)的含量。
有效期:6个月
保存条件:2-8℃
本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠Toll样受体4(TLR4)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠Toll样受体4(TLR4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
酶联免疫吸附测定法( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay, ELISA )于1971年由Engvall和Perlmann创建成功,成为继免疫荧光和放射免疫之后又一具有重大意义和深远影响的免疫技术。该技术利用蛋白和聚苯乙烯表面疏水吸附的特性,将抗原-抗体特异性反应固定于固相载体表面进行,同时结合酶对底物的高效催化作用而产生高灵敏度的实验技术。由于酶的高效生物催化作用,一个酶分子在数分钟内可以催化几十或几百个底物分子发生反应,产生了放大效应,使得原来微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被检测出来,因此可成功应用于标本中微量物质含量的测定。
小鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒说明书服务须知:
1. 样本要求:液态类标本(细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑积液等)
2. 样本量:每个样本收集体积=120µl*检测指标数 。
3. 样本保存:请尽早检测,2-8℃保存一天;需更长时间须冷冻(-20℃或-70 ℃)保存。如需周期收集样本,请将样本及时分装标号后,置-20℃或-70 ℃保存。
1. 请提前告知我们:您样本的种属(人、大鼠、小鼠、兔、猪等)、样本数量、待测指标,以便我们提前准备相应的ELISA KIT。
2. 服务时限和内容:收到样本之日起10个工作日之内提交实验结果,具体包括实验方法、步骤、所用试剂、仪器、相关数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您。
收费标准:动物来源标本:25元/孔;人体来源标本:20元/孔;样本量大,标准孔免费,具体费用可与您区域的销售经理商议。
样本制备及注意事项:
1. 细胞培养上清:2000-3000转/分离心20分钟后取上清;
2. 组织匀浆:切割标本后,称重,按1:9生理盐水匀浆,5000转/分离心3-5分钟后取上清;
3. 血清:样本室温放置2小时或4℃过夜后取上清;
4. 血浆:可用EDTA、枸橼酸钠或肝素作为抗凝剂(根据试剂盒要求选择),样本加入10%抗凝剂混合10-20分钟,2000-3000转/分离心20分钟后取上清;
5. 尿液、胸水、腹水、脑积液等:2000-3000转/分离心20分钟后取上清。
信息问题解答
我能否使用自己的稀释液或者缓冲液?
◆ 每个试剂盒中都含有按配方配制的与特异性样品种属相配套的稀释液,以确保待检测的样品
被正确稀释。具体请参看说明书。
建议
◆ 确定待检测的样品在收集和制备时保证无菌操作。
◆ 如果要检测多个样品,将样品隔离并标记清楚以防相互污染。
◆ 检测前,将样品离心除去颗粒。将样品转移至新的离心管内,混合均匀。
◆ 在混合样品时,使用容积至少比样品体积大50%的离心管以保证混合充分。
我没有足量的稀释液去稀释所有的样品,怎么办?
◆ 试剂盒内提供说明书中所指定的足量的稀释液。能保证所有的标准品和样品检测两次。
◆ 如果没有推荐的稀释度,或者需要大量稀释,请在实验前计算出所需的稀释液总量,然后联
系技术服务部门获取额外的稀释液。
我能否使用试剂盒内非推荐的样品类型?
◆ 试剂盒内说明书中所指定的样品类型是经过验证可行的。其它未推荐的样品类型是没有经过
任何检测的。
特别提醒:
1.取样和存样所用的冻存管、离心管、吸头等需高温灭菌处理;
2.所有存样管口需以封口膜封好;
3.所有样品管壁需要用防水记号笔清晰标明编号(便于区分即可);
4.所有样品避免反复冻融
5.如有特别要求,请与服务该区域的销售经理讲明。
好消息:我们可以为您的实验量身定做市场上没有的ELISA KIT,您只需要提供或让我们代买:包被抗体、检测抗体和蛋白标准品即可.欢迎来电咨询我司“小鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒说明书”
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