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PF3,小鼠血小板第三因子ELISA试剂盒技术指导

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价格：￥4900

品牌名称：BIM(进口品牌)型号：原产地：美洲发布时间：2018/3/22 16:49:42更新时间：2024/11/20 9:12:34

产品摘要：PF3,小鼠血小板第三因子ELISA试剂盒技术指导用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠血小板第三因子（PF3）的含量。

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PF3,小鼠血小板第三因子elisa试剂盒技术指导

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠血小板第三因子（PF3）的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断

实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠血小板第三因子（PF3）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠血小板第三因子（PF3）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

PF3,小鼠血小板第三因子elisa试剂盒技术指导的抑制性测定法操作步骤
本法首先是将特异性抗体a包被于固相载体，经洗涤加入含有欲测抗原之待检样品。经孵育洗涤后再加一次未标记的特异性抗体b，而这次加入的抗体b于次包被于固相载体上的特异性抗体a对被测抗原来说都是特异性的，但不是用同种动物免疫制备的，否则可出现非特异性反应。经孵育洗涤后，再加酶标记抗b抗体，再经孵育洗涤后加底物显色进行测定。这种方法与双抗体夹心法不同之处是多加了一层抗体。因此，放大的倍数更高，故比双抗体夹心法更加灵敏。同时避免标记特异性抗体，而另一优点是只要标记一种抗抗体，即可达到多种应用。
用于测定抗原的尚有第4种叫做抑制性测定法（见图），它是先用抗原包被固相载体，然后分为二组，一组加入用参考抗体和被检标本混合孵育后的混合溶液，假如标本中不含抗原，则参考抗体未被结合。因此它可以和包被于固相载体上的抗原结合。如标本中含有抗原，则抗原先与参考抗体结合，故参考抗体不再与包被于固相载体上的抗原结合。对加入酶结合物（抗球蛋白）和底物仅显示剩余结合的抗体量。再与另一组不加待检标本的参考系统比较，被检标本对底物显色的抑制程度与标本中所含抗原量成比例，二者之差，即为欲测抗原的量。
被检标本对底物显色的抑制程度与标本中所含抗原的量成比例，二者之差即为欲测抗原的量。

ELISA常用的几种方法
一、双抗体夹心法测定抗原
将抗原免疫种动物获得的抗体吸附于固相表面;
加抗原，形成抗原-抗体复合物;
加抗原免疫第二种动物获得的抗体，形成抗体抗原抗体复合物;
加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体);
加底物。底物的降解量＝抗原量。
二、直接法测定抗原
将抗原吸附在载体表面；
加酶标抗体，形成抗原—抗体复合物；
加底物。底物的降解量＝抗原量。
三、间接法测定抗体
将抗原吸附于固相载体表面；
加抗体, 形成抗原-抗体复合物；
加酶标抗体；
加底物。测定底物的降解量＝抗体量。

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