企业档案
会员类型：体验版会员
已获得易推广信誉 等级评定
41成长值
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
易推广体验版会员：14年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号：**** 【已认证】
法人代表： 【已认证】
企业类型：经销商 【已认证】
注册资金：人民币**万 【已认证】
产品数：25336
参观次数：12993908
手机网站：http://m.yituig.com/c58712/
旗舰版地址：http://www.jmbiosh.com
技术文章
劲马生物|实验室细菌菌种的保存
点击次数：6743 发布时间：2024/3/22 10:18:23
在微生物学、环境科学、分子生物学、毒理学、酶学、疫苗制备、药品生产等等域的实验过程中，都需要应用各种细菌，储备标准菌种、参考菌种、特殊菌种是必不可少的，下面就给大家介绍几种实验室菌株的保存方法。
1.斜面低温保存法
将分纯的待存菌接种于适宜的固体斜面培养基上，得到充分生长后，用封口膜封口，贴上标签，保存于4℃的冰箱中。此法操作简单、使用方便、不需要特殊设备，是实验室菌种保存常用的方法。但保存时间短，一般每个月都要移种1次，而且菌种容易变异，所以此方法只适合实验室短期实验菌株的保存。
2.半固体琼脂法
用接种针将以分纯的待存菌，穿刺接种于半固体中，放入培养箱培养后取出，封上无菌的液体石蜡，贴上标签，放4℃冰箱保存。此方法简便易操作，不需特殊设备、技术难度不大，但保存的时间不长，一般只能保存1年以内，而且对抵抗力弱以及一些特殊菌种大概只能存活3～6个月，需要频繁的传代，这样很容易使菌株受到污染、变异。所以此方法不适用菌种的chang期保存，只适合实验室一些要求不高的菌种的短期保存。
3.液体石蜡保存法
将液体石蜡灭菌，放于37℃恒温箱中，使水汽蒸发掉备用。再将已分纯的待存菌在适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体，用无菌吸管吸取已灭菌的液体石蜡，注入已长好的斜面培养基上，用量以高出斜面1cm为准，将试管直立，贴上标签，置4℃下保存。此法制作简单，不需要特殊设备，菌种可以保存1年左右不需要经常移种，缺点是保存的时候需要直立放置。此方法适合实验室短期菌株的保存，而且保存时需要一定的空间。
4.高层半固体琼脂石蜡保存法
将待存菌经平板划线分离后，挑单个菌落用接种针反复穿刺接种到高层半固体琼脂培养基中，经培养箱培养后取出，用灭菌过的液体石蜡滴加到半固体琼脂菌种管表层约0.5cm高度，贴上标签，存放4℃冰箱。此法操作简便，不需要特殊设备，效果好，可以保存菌株1～2年。（此法适合较长时期的保存）
5.纸片法
将已分纯的待存菌用无菌镊子镊取纸片，在纸片上刮取4～5个菌落，放入冻存管内，盖上盖子后用封口胶布封住边缘，贴上标签，放入冰箱冷冻保存（-20℃左右）。此法操作简单、不需特殊设备、经济实用、保存空间小等，而且保存时间至少2年，但对一些营养要求比较高的菌种，存活率不理想。所以此方法适合实验室一些营养要求不高的菌种较长时间的保存。
6.甘油液保存法
将已分纯的待存菌接种于肉汤中，37℃培养18～24h，然后按5份肉汤溶液、2份甘油生理盐水保存液的比例分装于灭菌的微量离心管或细胞冻存管中，贴上标签，置-80℃~-20℃冰箱保存。此法操作简便，不需特殊设备，效果好，可以保存菌种3年左右，无变异现象，而且此方法还可以保存一些要求较高的特殊菌种，适用范围广。（此法适合较长时间的保存）
7.湿牛奶冻存法
将待存菌种于各自生长良好的平板培养基上，经分纯后放入培养箱培养。用准备好的保护剂牛奶洗下菌苔，再用无菌毛细滴管吸取菌悬液滴入菌种管球部，每管球部约有一半的菌液，之后火焰封口，贴上标签，保存于-20℃冰箱。此法操作较简便，不需特殊设备、不需要花费很多时间，而且保存时间大约3年，时间较长不易变性，也不易污染。（此法适合较长时间的保存）
8.蒸馏水保存法
取灭菌蒸馏水6~7ml加于已接待存菌斜面培养基的试管内，用吸管研磨，洗下斜面上的菌苔，充分混匀，将此菌液分装于灭菌的螺旋小瓶中，或用胶塞密封，贴上标签，置于4℃保存。此法制作简单，不需要特殊设备，且不需要经常移种，而且可以保存数年，但要注意保存的时候需要直立放置。（此法适合具有条件的实验室较长时间的保存）
9.冷冻真空干燥法
将待存菌分纯后，用准备好的保护剂牛奶洗下菌苔，把菌悬液滴入菌种管后，在管口抽取少许棉花塞入管内细颈处，放入冰箱-40℃速冻40min，放入准备好的混有盐的冰中，接上真空泵，真空抽干呈粉末状，火焰封口，贴上标签，保存于-40℃冰箱。此法保存时间长，可达15年，不易变性，但需要仪器，一般实验室难以配备，而且过程复杂，操作难度大，需要较长时间才能完成。
综上所述，我们在做实验的过程中或者短期保存菌种时，可以选择斜面低温保存法、半固体琼脂法、液体石蜡保存法、高层半固体琼脂石蜡保存法、纸片法，进行保存；如果需要较长时间的保存菌株，可以选择甘油液保存法、湿牛奶冻存法、蒸馏水保存法、冷冻真空干燥法保存菌株，其中冷冻真空干燥法需要实验室配备相应的仪器设备。如果一些菌株营养要求比较高的话，可以选择甘油液保存法、冷冻真空干燥法保存。当然上述菌株保存的方法也只是一部分方便的保存方法，还有更多的方法需要我们不断的探索和研究。
原创作者：上海劲马实验设备有限公司
相关产品
-
电议 型 号： -
-
电议 型 号：
-
电议 型 号：
-
电议 型 号：
