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劲马文献:超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒在文献中的应用
点击次数: 159发布时间:2011/3/7
资料简介:
朱付平1,周钰龙2,李晓军2,李武平1,徐文展2
(1.湖南中医药大学附属医院,湖南 长沙 410007;
2.湖南中医药大学,湖南 长沙 410208)
按照随机原则将其分为对照组、缺血再灌注组(IR组)及桃红四物液组(T-IR组)。IR组和T-IR组在造成缺血前12 h、造成缺血时、再灌注时分别给予生理盐水和桃红四物液灌胃1次,以后每天早晚各1次。再灌注后12 h、1 d、3 d、5 d、7 d采血,用ELISA法检测血清中SOD与MDA的浓度。结果:IR组与T-IR组血清SOD、MDA浓度分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);IR组与TIR组SOD浓度从再灌注后12 h开始均升高,MDA浓度均降低,但T-IR组SOD与MDA浓度变化幅度均较大,差异均有统计学意义(P<0.05);在相同时间点上与IR组比较,T-IR组SOD浓度较高,MDA浓度较低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:桃红四物液可提高肢体缺血再灌注损伤大鼠血清SOD的浓度,降低MDA浓度,减少氧自由基产生,减轻过氧化反应。
[关键词] 桃红四物液;肢体缺血再灌注损伤;超氧化物歧化酶(SOD);丙二醛(MDA);大鼠肢体缺血-再灌注损伤 (limb ischemia reperfu-sion injury,LIRI)是肢体缺血损伤和再灌注损伤的合称,为临床常见的一种复杂病理过程,其发生的机制中氧自由基的作用已被证实[1-2]。而超氧化物歧化酶(SOD)作为内生的氧自由基清除剂可以清除体内代谢产生的氧自由基;丙二醛(MDA)是氧自由基作用于细胞膜脂的产物,其浓度变化可以间接反映氧自由基的含量变化。现有的研究表明桃红四物汤具有促CAM(鸡胚绒毛尿囊膜)血管生成[3]、抗血小板活化[4]、抗氧化[5]等作用。我院自制药剂桃红四物液是在清代吴谦《医宗金鉴》中记载的桃红四物汤的基础上加减化裁,利用现代工艺加工而成的,我们在防治LIRI的临床应用中取得了很好的疗效,但其作用机制一直未被阐明。因此,本实验旨在通过观察桃红四物液对肢体缺血再灌注损伤大鼠血清SOD和MDA浓度的影响,进而明确桃红四物液对LIRI防治作用的机制,为进一步开发利用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 本实验选用2月龄清洁级SD雄性大鼠88只,体质量220~240 g,购自湖南中医药大学动物实验中心,动物许可证编号:SYXK(湘)2013-0005。
1.2 药物与试剂 桃红四物液由湖南中医药大学附属医院制剂科提供,250 mL/瓶(每毫升含有生药0.15 g),批号:20140408;超氧化物歧化酶(SOD)elisa试剂盒(上海劲马实验设备有限公司)、丙二醛(MDA)elisa试剂盒(上海劲马实验设备有限公司);乌来糖(国药集团化学试剂有限公司);0.9%NaCl(湖南科伦制药有限公司);TGL16M台式高速冷冻离心机(长沙科威实业有限公司);BD-180S双层门冷冻柜(青岛海尔冷柜总公司);普通手术器械。
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