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人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)Elisa试剂盒说明书
人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)Elisa试剂盒说明书
是一家技术服务型渠道企业,在行业发展中所承担的角色是一种沟通产出方和需求方(科研和市场)的媒介,我们致力为行业人才提供了包括科研在内的更多出口,为科研提供了有力的硬件支持,有效地促进科研和市场需求结合,提高了科研成果的转化效率,使得科研更具活力。目前国家对于生物行业的发展给予了极大的重视,但更多地侧重于科研的投入,行业内缺乏一流的技术服务体系和渠道支撑...
检测范围:96T 0.6ng/ml - 16ng/ml
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)水平。用纯化的人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入嗜环蛋白/亲环素A(CyPA),再与HRP 标记的嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)浓度。
人Elisa试剂盒组成:
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人Elisa试剂盒操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)Elisa试剂盒说明书
原创作者:里苏(上海)生物技术有限公司