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人β2－内啡肽（β2－EP）酶联免疫分析elisa试剂盒使用说明书
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上 传 者：上海沪峰化工有限公司
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人β2－内啡肽（β2－EP）酶联免疫分析elisa试剂盒使用说明书
公司本着服务科研，以质量求生存，以信誉求发展的精神，精益求精，力求做到更好。全体员工孜孜不倦为国内科研事业单位以及高校等提供优质的产品服务，以尽一份绵薄之力！在广大客户的支持和全体员工的努力下，公司正在日益发展和壮大。 不管是过去还是现在和将来，公司全体员工将再接再厉，以优质的服务态度，全新的精神面貌，为广大新老客户，提供优质的产品和售后服务，让我们携手共创美好未来！
elisa试剂盒使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中β2－内啡肽（β2－EP）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人β2－内啡肽（β2－EP）水平。用纯化的人β2－内啡肽（β2－EP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入β2－内啡肽（β2－EP），再与HRP标记的β2－内啡肽（β2－EP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的β2－内啡肽（β2－EP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人β2－内啡肽（β2－EP）浓度。
elisa试剂盒组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（4000ng/L） 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2000 ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
1000 ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
500 ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
250 ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
125 ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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