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mosquito LCP:让膜蛋白结晶触手可及
上海沪峰是由留学美国多年的著名资深学者创办的一家技术企业,与中国农业大学、华中农业大学、哈尔滨兽医研究所等多家高校及生物技术研究机构建立了合作关系。公司以开发的动物疾病诊断试剂、食品安全检测试剂、人体疾病诊断试剂、环境监测试剂、新型酶制剂、微生物制剂、蛋白质产品、核苷酸产品、绿色水产药品、小分子抗原抗体、基因重组抗原抗体等生物化学制品为主,以的化企业经营理念、雄厚的研发实力、规范化的生产标准、健全的销售网络、完善的技术服务体系和广阔的国内外合作网络服务于全球,致力于生物制剂在全球的产业化。
mosquito® LCP为一个富有挑战性的手动过程提供了高通量、高准确性和无以伦比的重复性。它固有的灵活性使结晶学中其他气相扩散方法得以开展,为科学家们带来了广泛的选择,可满足任一具体项目。它的精确、可靠和易用让更多的科学家有机会使用到这种新颖的膜蛋白结晶技术。
完整的膜蛋白如G蛋白偶联受体(GPCR)和离子通道,是参与细胞信号通路、细胞稳态和人类疾病的关键分子;大约三分已批准的药物靶定了这些蛋白。因此,获得膜蛋白的高分辨率结构信息,以便与分子和细胞数据互补,对科学界和药物开发行业相当重要。
众所周知,膜蛋白很难纯化和结晶,因为它们在天然脂双层之外的环境中不稳定,容易沉淀。正因为如此,使用水溶液的结晶学传统方法不适合它们的重新溶解。在1996年,科研人员开发出一种in meso脂立方相(LCP)技术,实现了细菌视紫红质的结晶1,从那以后也彻底改变了膜蛋白的结晶过程。这种方法为膜蛋白的成核和生长提供了一个框架,从而促进了结晶。
LCP结晶是通过两个步骤开展的。首先,蛋白与脂类混合,自发形成脂立方相,产生了果冻状的高粘稠物质。为了加强结晶,还添加了添加剂和沉淀物,取决于不同条件,结晶一般在数日或数周出现。
结晶试验通常包括在样品上试验的大量条件。高效的结晶试验不仅需要尽可能降低样品体积,以确保宝贵蛋白的限度利用,还需要自动化开展,以便减少艰苦的体力劳动并加速平板制备过程。自动化减少了手动移液的误差,并确保了样品均一性。
目前与LCP方法相关的多个技术问题为此过程的自动化带来了挑战。然而,主要问题在于很难准确处理小体积且极为粘稠的立方相材料,直到*近,这一问题才成功解决。
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