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人Bcl-2相关X蛋白elisa试剂盒使用说明书

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上传时间:2012/9/19 10:27:04

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上 传 者:上海沪峰化工有限公司

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                                人Bcl-2相关X蛋白elisa试剂盒使用说明书
公司是一家专业经营生物、仪器、试剂、耗材的公司,在广大用户的帮助和支持下,经过不懈的努力,已成为国内生命科学领域产品的主要供应商,代理许多水平的高科技产品,包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。公司的服务和业务网络遍及全国,在同行获得一致好评。 特别是生物试剂和细胞产品更是种类齐全、价格实惠,美国原装进口原代细胞,专业培养基,常用传统培养基,细胞培养用的相关试剂,氨基酸,抗生素,维他命类产品品种齐全,试剂耗材种类繁多。

 人elisa试剂盒使用目的:
  本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中Bcl-2相关X蛋白(BAX)含量。
人elisa试剂盒实验原理
  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Bcl-2相关X蛋白(BAX)水平。用纯化的人Bcl-2相关X蛋白(BAX)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Bcl-2相关X蛋白(BAX),再与HRP标记的Bcl-2相关X蛋白(BAX)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的Bcl-2相关X蛋白(BAX)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人Bcl-2相关X蛋白(BAX)浓度。
人elisa试剂盒组成
1 20倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 3ml×1瓶
2 酶标试剂 3ml×1瓶 8 标准品(48μg/L) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×4条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 3ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 3ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 3ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
24μg/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液


加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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