企业档案

  • 会员类型:免费会员
  • 工商认证: 【已认证】
  • 最后认证时间:2014年
  • 法人:李*
  • 注册号:22223232398****
  • 企业类型:生产商
  • 注册资金:人民币***万

ELISA试剂盒

培养基

动物血清

试剂盒实验免费代测

标准品对照品

细胞

生物试剂

抗体

代理品牌

联系我们

联系人:李经理

点击查看联系方式

公司动态

鸡褪黑素elisa试剂盒操作步骤

点击次数:767 发布时间:2012/8/7

人褪黑素elisa试剂盒操作步骤

人elisa试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中人褪黑素(FSH)含量。

人elisa试剂盒实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人褪黑素(FSH)水平。用纯化的人褪黑素(FSH) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH),再与 HRP 标记的人褪黑素(FSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜 色的深浅和样品中的人褪黑素(FSH)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值) ,通过标准曲线计算样品中大鼠促卵泡素(FSH)浓度。

实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人褪黑素(FSH)水平。用纯标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释: 本试剂盒提供原倍标准品一支, 用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 2000pg/ml 1000pg/ml 500pg/ml 250pg/ml 125pg/ml 5 号标准品 4 号标准品 3 号标准品 2 号标准品 1 号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液 150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2.
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、标准孔、 待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样 50μl, 待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,
然后再加待测样品 10μl(样品*终稀释度为 5 倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同 3。 8. 洗涤:操作同 5。 9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟. 10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。 11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 测定应在加终止 。 液后 15 分钟以内进行。

相关产品

script>