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人白三烯D4(LTD4)ELISA Kit
Human leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit
DIY夹心法ELISA常见技术指南
1选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对；若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体；从同一家公司选择抗体对。
2 ELISA实验中为了确定信号和背景应将捕获抗体(0.5-4μg/ml)和检测抗体(0.25-2μg/ml)在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
3 标准品的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。
4一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
5 为了优化灵敏度，建议过夜孵育标准品和标本。
6若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
7 当测定混合液体中的抗原时，如血清，建议在标本稀释液中加不相干的Ig.
使用目的：
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中“产品名称”含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中(产品名称)水平。用纯化的其抗体包被微孔板，制成固相抗体。往包被单抗的微孔中依次加入本产品，再与HRP标记的其抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中产品的浓度。
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