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人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒
点击次数：218发布时间：2012/1/11 12:14:08
更新日期：2022/8/20 18:55:11
所 在 地：中国大陆
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详细内容
人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒《《组织标本处理》》：
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻吧保存备用，标本融化后仍然吧保持2-8℃的温度，加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器讲标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)ELISA试剂盒《《操作步骤》》
1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。
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