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技术文章
河南大学张老师分析豚鼠α防御素（α-DF）ELISA试剂盒实验原理及注意事项
点击次数：14944 发布时间：2015/12/31 8:46:24
昨日，河南大学张老师来电咨询了我司豚鼠α防御素（α-DF）elisa试剂盒，在咨询的过程中她有问到我司豚鼠α防御素（α-DF）ELISA试剂盒的使用目的及实验原理，说想对豚鼠α防御素（α-DF）ELISA试剂盒进行分析，分析一下是检测含量的还是检测什么的，实验过程中应注意哪些事项，下面是我司钱经理为张老师提供的一些资料（仅供参考）
豚鼠α防御素（α-DF）ELISA试剂盒目的:本试剂盒用于测定豚鼠血清,血浆及相关液体样本中α防御素（α-DF）的含量。
豚鼠α防御素（α-DF）ELISA试剂盒实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中豚鼠α防御素（α-DF）水平。用纯化的豚鼠α防御素（α-DF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α防御素（α-DF），再与 HRP 标记的α防御素（α-DF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的α防御素（α-DF）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中豚鼠α防御素（α-DF）浓度。
豚鼠α防御素（α-DF）ELISA试剂盒注意事项：
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存；
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果；
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样；
4.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）；
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染；
6.底物请避光保存；
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准；
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理；
9.本试剂不同批号组分不得混用。
原创作者：上海恒远生物技术发展有限公司
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