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恒远技术解说关于大鼠γ干扰素检测样本明确要求
点击次数：15124 发布时间：2016/1/11 10:13:33
大鼠γ干扰素检测试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠γ干扰素(IFN-γ)水平。用纯化的大鼠γ干扰素(IFN-γ)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入γ干扰素(IFN-γ)，再与HRP标记的γ干扰素(IFN-γ)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠γ干扰素(IFN-γ)浓度。
代测样本要求注意事项：
1. 样本不能含叠氮钠(NaN3)，因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
2. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能立即试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
3. 样本应充分离心，不得有溶血及颗粒。
4. 实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
5. 酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
6. 建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。
7. 牢记样本已经稀释5倍，计算结果乘以5才是样本实际浓度。
8. 本试剂盒定量范围为75pg/ml-2400pg/ml，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，不做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(75pg/ml-2400pg/ml范围内)，乘以总稀释倍数即为样本*终浓度。
9. 若显色过浅，可适当延长底物温育时间。
10. 为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，不得碰到微孔；不得重复使用封板膜。
11. 试剂盒保质期内使用，不同批号的试剂不得混用。
12. 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
原创作者：上海恒远生物技术发展有限公司
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