人甲型流感病毒抗原（Flu A-Ag）elisa试剂盒实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲型流感病毒抗原（Flu A-Ag）表达。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中甲型流感病毒抗原（Flu A-Ag）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中人甲型流感病毒抗原（Flu A-Ag）的存在与否。
人甲型流感病毒抗原（Flu A-Ag）ELISA试剂盒操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先
加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人甲型流感病毒抗原（Flu A-Ag）ELISA试剂盒计算和结果判定 ：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为人甲型流感病毒抗原（Flu A-Ag）阴性阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为人甲型流感病毒抗原（Flu A-Ag）阳性。

原创作者：上海恒远生物技术发展有限公司