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技术文章
样本的采集及贮运操作不当会影响ELISA实验结果
点击次数:14791 发布时间:2016/9/1 9:22:17
ELISA(酶联免疫试验)以其灵敏度较高、特异性好的特点已广泛用于科研实验及临床,越来越多科研单位选择用ELISA实验方法完成研究课题,所以,ELISA就有较大的科研前景。实验的步就是要准备好样本,样本的收集跟保存听上去貌似很简单,但不乏有许多客户是因为样本的收集跟保存没做好而影响实验结果。上海恒远作为专业的elisa试剂盒厂家必须对影响ELISA实验结果各因素有一定的认识。才能全方位为客户提供*优质的服务。优质的试剂 、好的仪器和正确的操作是保证ELISA试剂盒检测结果准确可靠的必要条件。
下面针对样本收集跟保存两点上海恒远提几个建议:
1.严重溶血,以HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性;
2.混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应:
3.标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;
4.采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染:塑料试管能吸附抗原物质,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
血清标本宜在新鲜时检测,严重溶血标本禁用。一般说来,在 5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的 试剂 本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使 抗体 效价跌落,所以测 抗体 的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存;使用一次性玻璃试管或真空管采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性;血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管或于采血管中加入适当的促凝剂。
上海恒远源自的酶联免疫技术,涵盖国内外专家的经验与智慧。采用的技术和设备,确保品质的同时,降低成本,为更多有需要的研究人员,节省实验经费,保证实验质量,为国家的科技发展多做贡献。多家生物科研基地合作伙伴,实力团队倾力打造专注于ELISA试剂盒的生产,研发,助力您的科研试验!另:近期我司开学季促销活动仍在继续,如有需要,欢迎来电咨询订购!
原创作者:上海恒远生物技术发展有限公司