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技术文章

探讨:培养基检测水体细菌总数实验

点击次数:15050 发布时间:2018/12/19 10:13:30

    近日,我公司的培养基新品推出后得到可客户们的良好反应。有客户在售后反馈表中提出,在公司wang站中可以多分享一些相关培养 基的细胞培养实验技术,对此问题我们会多加注意,后期会陆续增加 培养基技术篇幅。今天我们来看看zui新实验探讨:培养基检测水体细菌总数实验。

一、所需培养基
营养琼脂、肉浸汤琼脂、蛋白胨葡萄糖琼脂、857培养基。

二、样品来源
1998年1O月随机采取本市便河居民点生活用自来水,便河河水及本院池塘塘水各9份。

三、操作方法
自来水采样:先将采样点自来水龙头完全开放,放水5分钟后调水流量,常规无菌采集水样500ml,并加入无菌的3%硫代硫酸钠溶液 0.5ml以除去残余氯;河水与塘水采样:先将密封状态的无菌采样瓶完 全浸入水中后,掀开瓶塞,取样约500ml。进行细菌总数检测。每次以 无菌方法分别吸取lml充分混匀的水样于灭菌空平皿中,每份水样各加 8个,每2个为1组,随即分别加入15ml灭菌并置45℃预温的营养琼脂、 肉浸汤琼脂、蛋白胨葡萄糖琼脂、857琼脂并充分混匀,凝固后,置 37~C培养24h、48h、72h、96h并分别记录各培养基中菌落形成单位 (CFU)均数。采用秩和检验进行统计学分析。

四、结果
4种方法培养后CFU均数结果:24h内4种培养基的CFU均数,随培养时间延长而增高(见下表)。

培养时间(h) 营养琼脂 肉浸汤琼脂 蛋白胨葡萄糖琼脂 857培养基
24 74 100 76 16
48 105 138 103 26
72 120 152 121 32
96 133 163 130 36

    不同时间培养后4种培养基的CFU均数的结果显示:培养48h与72h 、72h与96h组间CFU均数差异无显著性;培养24h与48h,24h与72h、 24h与96h、48h与96h各组间、CFU均数的差异有高度显著性(P<0.01)。

    4种培养基的CFU均数间两两比较:除营养琼脂培养基与蛋白胨葡萄糖琼脂培养基之间CY U均数的差异无显著性外,肉浸汤琼脂培养基与营养琼脂培养基、肉浸汤琼脂培养基与蛋白胨葡萄糖琼脂培养基、肉浸汤琼脂培养基与857培养基、营养琼脂培养基与857培养基、蛋白胨葡萄糖琼脂培养基与857培养基、CFU均数的差异均有高度显著性 (P<0.01)。 
       
    本实验采用包括营养琼脂培养基在内的4种不同培养基进行检测, 结果表明,不同培养基之间CFU均数差异显著,且肉浸汤琼脂培养基> 营养琼脂培养基>蛋白胨葡萄糖琼脂培养基>857培养基。值得注意的是 肉浸汤琼脂培养基与营养琼脂培养基的CY'U均数差异显著,且培养至 24h观察结果时,肉浸汤琼脂培养基表面的菌落较大,易辨认,而营养 琼脂培养基上菌落较小,需培养48h后计数。这可能与前者用新鲜牛肉 浸液配制,而后者用牛肉膏配制有关。因肉浸汤琼脂培养基营养高于 营养琼脂培养基,更有利于水体样本中细菌总数的检测。

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原创作者:上海恒远生物技术发展有限公司

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