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技术文章
ELISA试剂盒实验灵敏度高的原因
点击次数：14295 发布时间：2023/3/27 16:22:16
ELISA试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启发，提高试验质量。
ELISA试剂盒试验操作中可能影响结果的原因及解决办法分析：
1 选择试剂
选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱等待时间过长(特别是室内温度较高时)；
3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
ELISA试剂盒解决办法：
1） 标本为血清：好将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。
原创作者：上海恒远生物技术发展有限公司
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