近年来，随着检测技术的发展，酶联免疫吸附试验（ELISA）因其高灵敏度和特异性，在海藻糖检测中得到了广泛应用。恒远生物为你介绍ELISA试剂盒在海藻糖检测中的应用。

在海藻糖检测中，ELISA试剂盒通常采用双抗体夹心法。

具体步骤如下：

准备工作：将ELISA试剂盒从冷藏环境中取出，在室温下平衡20-30分钟。准备所需的试剂和器材，如酶标仪、高精度加样器、

洗板机等。

标准品稀释：按照说明书要求，将原倍标准品进行梯度稀释，以制备不同浓度的标准品溶液。

加样：在酶标包被板上设置空白孔、标准品孔和待测样品孔。向标准品孔中加入不同浓度的标准品溶液，向待测样品孔中加入待测

样品。注意加样时避免触及孔壁，轻轻晃动混匀。

温育：用封板膜封板后，将酶标板置于37℃恒温箱中温育一定时间（通常为30分钟至1小时）。

洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，用洗涤液反复洗涤酶标板数次，以去除未结合的抗原和抗体。

加酶：向每孔（空白孔除外）加入酶标试剂，继续温育一定时间。

显色：向每孔加入TMB底物溶液，避光显色一定时间（通常为10-15分钟）。此时，孔中的颜色深浅与样品中海藻糖的含量成正比。

终止反应：向每孔加入终止液，终止显色反应。此时，孔中的蓝色立即转变为黄色。

测定OD值：在酶标仪上设定450nm波长，依次测定各孔的OD值。以标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度为纵坐标，绘制标准曲

线。将待测样品的OD值代入标准曲线，即可计算出样品中海藻糖的含量。

注意事项

操作过程中应严格遵守试剂盒说明书的要求，确保实验结果的准确性和可靠性。

实验中所使用的试剂和器材应保持清洁无污染，避免交叉污染影响实验结果。

加样和洗涤过程中应注意操作细节，避免产生气泡和液体溅出。

显色反应应在避光条件下进行，避免光线对实验结果的影响。

实验结束后应及时处理废弃物并按生物安全要求处理实验器材和试剂。

ELISA作为一种高效、灵敏的检测方法，在海藻糖检测中展现出显著优势。随着技术的不断进步和试剂盒的不断优化，ELISA在海藻糖检测中的

应用将更加广泛和深入。

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原创作者：上海恒远生物技术发展有限公司