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人骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)
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产品名称:人骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B) 英文名称: Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA KIT
产品规格:96T/48T
品牌:RD 、 RB、 IBL
保存条件:2-8℃
类别:ELISA试剂盒/人的ELISA检测试剂盒
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人骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
8 ng/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
4 ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
2 ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
1 ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
0.5 ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后
再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触
及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复
5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后
15分钟以内进行。
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