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肺炎衣原体感染实验室诊断与结果分析
肺炎衣原体(chlamydia pneumonia,Cpn)第1个代表菌株TW—183株,是1965年从一名台湾儿童的眼结膜分离出来的,1983年又自美国一位急性呼吸道感染患者的咽部分离出另一株衣原体定名为AR-39。后又发现这两株衣原体为同一菌株,命名为TWAR。该菌具有严格的细胞内寄生特点,不但常引起肺炎,支气管炎等急性呼吸道感染,而且和动脉硬化性心血管疾患的发病有关,严重威胁人类健康。
[病因学] 肺炎衣原体过去称为台湾急性呼吸道病原体。该病原体与鹦鹉热和沙眼衣原体有相同的属特异性抗原,而其他特异性抗原血清学特征却不同。通常DNA杂交试验和限制性核酸内切酶分析确认其为不同于沙眼和鹦鹉热衣原体的第3种衣原体。
[实验室诊断]
1.特异性检查
(1)病原体分离与培养。
(2)肺炎衣原体抗原检查:
①荧光免疫试验;
②ELISA;
③PCR技术;
④核酸杂交技术。
(3)肺炎衣原体抗体检测。
2.非特异性检查
①血常规检查;
②红细胞沉降率。
[结果分析与判断]
1.病原体分离与培养 鸡胚或细胞组织培养,难度大,因阳性率低已少用。常用咽拭子采样,自下呼吸道采集标本阳性率高,是确诊本病的可靠方法。
2.肺炎衣原体抗原检查
①荧光免疫试验是快速诊断试验,但敏感性不高。多克隆抗体有届特异性,不能区分是肺炎衣原体或其他衣原体感染。以荧光标记的种特异性McAb可识别肺炎衣原体或胞浆内包涵体,特异性和敏感性均较高,但荧光显微镜质量和操作熟练程度会影响检测结果。
②ELISA是检测标本中肺炎衣原体抗原简便快速有效的方法,但与细菌有交叉反应,可出现假阳性。
③PCR血清学检查以识别主要外膜蛋白(MOMP)基因片段的套式PCR检测痰肺炎衣原体抗原,获得较好效果,可能是今后检测的主要方法。
④核酸探针检测衣原体特异性较强,但敏感性不高。常用于PCR扩增结果的确定,以提高肺炎衣原体诊断的敏感性。
3.肺炎衣原体抗体检测 微量免疫荧光试验是*常用的方法。以Cpn EB为抗原的间接免疫荧光抗体法检测特异性IgM及IgG抗体,诊断标准是IgM抗体滴度≥1:16或IgG抗体≥1:512,或急性期及恢复期双份血清IgG抗体4倍以上增高者均可诊断为急性感染,IgM抗体阳性可作早期诊断。如IgG抗体滴度为1:16~l:512,则为既往感染。本方法特异性及敏感性均高,具有型特异性,可用于诊断并能区分原发感染和再感染。
4.非特异性检查 外周血白细胞计数多正常,ESR多增快。
本病缺乏特异性临床表现,与病毒性肺炎、支原体肺炎及鹦鹉热衣原体肺炎、沙眼衣原体肺炎等其他肺炎难以鉴别,故对肺炎及上述临床表现者,尤其是对用β内酰胺类抗生素无效者,应考虑本病,需做病原学或血清学检测来确诊。
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