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现货供应人抗苗勒氏管激素ELISA 检测试剂盒说明书

点击次数:373 发布时间:2012/10/29 14:32:36

人抗苗勒氏管激素ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆

试验原理:
AMH试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知AMH浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将AMH和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中AMH的浓度呈比例关系。

试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板(48T) 即用型
塑料膜板盖 1块 半块 即用型
标准品:400pmol/L 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按说明书进行稀稀
空白对照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
标准品稀释缓冲液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
生物素标记的抗AMH抗体 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
亲和链酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按说明书进行稀释
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
终止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
标本稀释液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型

人抗苗勒氏管激素ELISA 检测试剂盒自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
400 pmol/L (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。
200 pmol/L (5号标准品) 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液
100 pmol/L (4号标准品) 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液
50 pmol/L (3号标准品) 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液
25 pmol/L (2号标准品) 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液
12.5 pmol/L (1号标准品) 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液
0 pmol/L (空白对照) 原始浓度不用稀释直接加入50ul。

2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。


操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案
 标准品浓度(pmol/L) 
A 400 400 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
B 200 200 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
C 100 100 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
D 50 50 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
E 25 25 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
F 12.5 12.5 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
G 0 0 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品
H 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品 样品人抗苗勒氏管激素ELISA 检测试剂盒
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度:*小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的AMH标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的AMH含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围:0-400pmol/L

4、敏感度: 1.0 pmol/L
小鼠白介素15(IL-15)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 15,IL-15 ELISA试剂盒
小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒 Mouse 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA试剂盒
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 1α,IL-1α ELISA试剂盒
小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 2,IL-2 ELISA试剂盒
小鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 4,IL-4 ELISA试剂盒
小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 6,IL-6 ELISA试剂盒
小鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 9,IL-9 ELISA试剂盒
小鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒 Mouse Leptin receptor,LR/Ob-R ELISA试剂盒
小鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒 Mouse Leptin,LEP ELISA试剂盒
小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒 Mouse Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA试剂盒
小鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1β,MIP-1β ELISA试剂盒
小鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 3α,MIP-3α ELISA试剂盒
小鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA试剂盒 Mouse matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA试剂盒
小鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA试剂盒 Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA试剂盒
鼠抗人D-泛酸(Pantothenic Acid)单抗 Mouse anti-human D-Pantothenic Acid mAb
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒  Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA试剂盒
小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒  Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA试剂盒
小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)ELISA试剂盒  Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA试剂盒
小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)ELISA试剂盒  Mouse phosphatidylserine,PS ELISA试剂盒
小鼠胆碱磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA试剂盒  Mouse choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISA试剂盒
小鼠β-防御素(β-DF)ELISA试剂盒  Mouse β-Defensins,β-DF ELISA试剂盒
小鼠Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA试剂盒  Mouse Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISA试剂盒
小鼠神经丝蛋白(NF)ELISA试剂盒  Mouse neurofilament protein,NF ELISA试剂盒
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)ELISA试剂盒  Mouse small nuclear ribonucleoprotein,snRNP/Sm ELISA试剂盒
小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA试剂盒  Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA试剂盒
小鼠IgG ELISA试剂盒 Mouse IgG ELISA试剂盒
小鼠IgM ELISA试剂盒 Mouse IgM ELISA试剂盒
小鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒  Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA试剂盒
小鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISA试剂盒  Mouse anti-red cell antibody ELISA试剂盒
小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA试剂盒  Mouse carcinoembryonic antign,CEA ELISA试剂盒
小鼠CD19分子(CD19)ELISA试剂盒  Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA试剂盒
小鼠CD3分子(CD3)ELISA试剂盒  Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA试剂盒
小鼠小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒  Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA试剂盒

原创作者:上海抚生实业有限公司

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