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酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA KIT)
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人Ⅳ型肽精氨酸脱亚氨基酶（PAD4）ELISA检测试剂盒使用说明书
联系电话：021-34535391,15900443528，QQ:1162650610
进入该公司展台：http://www.app17.com/C63416/
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断
人（Human）Ⅳ型肽精氨酸脱亚氨基酶（PAD4）ELISA检测试剂盒使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预
先包被Ⅳ型肽精氨酸脱亚氨基酶（PAD4）抗体的包被微孔中，依次
加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用
底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作
用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的Ⅳ型肽精氨酸脱亚
氨基酶（PAD4）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD
值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞
刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地
分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟
取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于
-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的
浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解
后再使用。洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5 次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min 内，在450nm 波长处测定各孔的
OD 值。
结果判断
绘制标准曲线：在Excel 工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应
OD 值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样
本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值，大于等于
0.9900。
2. 灵敏度：检测浓度小于1.0 U/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6 个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所
产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者
承担。
原创作者：上海继锦化学科技有限公司
