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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ELISA抗体检测试剂盒
点击次数:504 发布时间:2012/4/19 23:45:57
联系电话:021-34535391,15900443528,QQ:1162650610 进入该公司展台:http://www.app17.com/C63416/ 【用途】
猪蓝耳病ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中猪蓝耳病病毒抗体。评估猪场猪蓝耳病疫苗免疫状况。猪蓝耳病的流行病学调查。
【简介】
猪蓝耳病对猪影响的特征是引起猪严重的流产(早产,流产,弱胎,死胎)和呼吸道症状,引起流产是猪蓝耳病的一个特征,而呼吸道症状也很严重,特别在育成猪上,它严重的影响了猪的生长(高投入低产出),造成巨大的经济损失。
世界上许多地区还没有精确地测定此病的感染率,许多国家估计高达80%。
此病的主要症状是繁殖障碍,引起早产、后期流产、弱仔、死产、胎儿木乃伊化、产仔率下降和发情期延迟等。这些症状可持续一到三个月。呼吸症状是此病的另一个显著特征,大多数发生于低于3-4周龄的仔猪,但也可发生于生产周期的大多数阶段。
血清学诊断技术是一项快速、特异的技术,可以直接检测猪蓝耳病病毒的抗体。
试剂盒由抗原包被的微孔板,酶标羊抗猪IgG及其它试剂制成,应用间接ELISA原理检测猪血清中抗猪蓝耳病病毒的抗体。
【原理】
本试剂盒是采用灭活过的猪蓝耳病病毒抗原包被微孔板,在试验中,按操作步骤加入对照血清和待检血清,经温育后,若样品中含有猪蓝耳病特异性抗体,则将与微孔板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与微孔板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,加入HF溶液中止反应后,用酶标仪630nm波长测定各反应孔中的OD值。
【试剂盒主要成分】
1、 包被抗原的微孔板 2块 (96孔)
2、 阴(绿盖)、阳(红盖)性对照血清 各1管 (1ml/管)
3、 抗猪IgG-HRP结合物 (黄盖) 1瓶 (22ml/瓶)
4、 20倍浓缩洗涤液(白盖) 1瓶 (30ml/瓶)
5、 底物A(紫盖)液、B液(黄盖) 1瓶 (12ml/瓶)
6、 终止液(蓝盖) 1瓶 (12ml/瓶)
7、 样品稀释液 (透明盖) 1瓶 (50ml/瓶)
【用前准备】
仔细阅读说明书,所有试剂在4℃条件下保存,禁止结冰,如果干燥袋发红不能使用,不用的孔必须密封好以防潮湿对平板有害,不要使平板接触强光和氧化物。不要使用过期的成分或混合使用成分。注意加样和冲洗,以确保试验的精确度和准确度。操作过程中注意安全,要使用手套,终止液含有氢氟酸使用要小心。所有的废液要经过处理和净化。
本品为兽用产品。
【未提供的需用材料】
微量加样器、加液槽、蒸馏水、恒温箱、酶标仪、吸水纸
【注意事项】
1、 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温。
2、 不同批号试剂盒的试剂组分不得混用。
3、 注意防止试剂盒各组分受污染。
4、 微孔板拆封后避免受潮或沾水(每次将剩余的微孔板用封口袋扎紧后尽快置于4℃)。
【试剂配制】
洗涤液:用蒸馏水稀释20倍浓缩洗涤液,混匀。
【操作步骤】
1、 取预包被的微孔板(根据样品多少,可拆开分次使用),用样品稀释液将待检样品40倍稀释后加入板孔中,每孔加100μl。阴、阳性对照各设2孔,每孔100μl。另设一空白对照孔,空白对照孔加100μl稀释液。轻轻振匀孔中样品(勿溢出),置37℃温育30min。
2、 甩掉板孔中的溶液,用洗涤液洗板3次,300μl/孔,每次静置3分钟倒掉,*后一次在不掉屑干净吸水纸上拍干。
3、 每孔加酶标二抗(抗猪IgG-HRP结合物)100μl,置37℃温育30min。
4、 洗涤3次, 方法同2。
5、 每孔加底物A液、B液各1滴(50μl),混匀,室温(20-25℃)避光显色10min。
6、 每孔加终止液1滴(50μl),10分钟内测定结果。
【结果判定】
以空白孔调零,在酶标仪上测各孔OD630值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630值大于或等于0.4,阴性对照孔平均OD630值必须小于0.2。
样品OD630值大于0.4,判为阳性;样品OD630值在0.2到0.4之间,判为可疑;样品OD630值小于0.2,判为阴性。
【规 格】 96孔×2块
【有 效 期】 6个月
【贮 存】 2-8℃避光保存
【生产日期】 见试剂盒外包装
提示:酶标板真空包装袋若有漏气,酶标板仍然正常有效,不影响实验结果,请放心使用。
原创作者:上海继锦化学科技有限公司