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牛结核分枝杆菌抗体(M.tuberculosis Ab)Elisa试剂盒说明书价格
点击次数:383发布时间:2012/7/11 10:48:43
更新日期:2012/7/11 10:48:43
所 在 地:中国大陆
产品型号:现货供应
优质供应
详细内容
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牛结核分枝杆菌抗体(M.tuberculosis Ab)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
使用目的:
本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中结核分枝杆菌抗体(M.tuberculosis Ab)的含量。
实验原理
本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本中牛结核分枝杆菌抗体(M.tuberculosis Ab)水平。用纯化的牛结核分枝杆菌(M.tuberculosis)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中加入结核分枝杆菌抗体(M.tuberculosis Ab),和HRP标记的结核分枝杆菌抗体(M.tuberculosis Ab),使它们竞争结合,,经过洗涤后加底物TMB显色。样本颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌抗体(M.tuberculosis Ab)的含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中牛结核分枝杆菌抗体(M.tuberculosis Ab)的含量。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 8 | 标准品S1(320pg/ml) | 0.5ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 标准品S2(160pg/ml) | 0.5ml×1瓶 | |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 标准品S3(80pg/ml) | 0.5ml×1瓶 | |
4 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 标准品S4(40pg/ml) | 0.5ml×1瓶 | |
5 | 显色剂B液 | 6ml×1瓶 | 标准品S5(20pg/ml) | 0.5ml×1瓶 | |
6 | 终止液 | 6ml×1/瓶 | 9 | 说明书 | 1份 |
7 | 样品稀释液 | 6ml×1/瓶 | 10 | 封板膜 | 2张 |
标本要求
1.标本处理:(1)水样 采集后经
(2)组织 样品用丁醇:甲醇:水(5:25:70 V:V:V)抽提,或按相关文献提取进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 加样:分别设标准孔、空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上标准孔中加50微升,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
2. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
3. 温育:用封板膜封板后置
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,
7. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
8. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
检测范围:
10pg/ml-320pg/ml
规格:
96人份/盒
保存条件及期
1.试剂盒保存:;2
2.期:6个月