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大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。
大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒使用说明书
【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒 试剂盒名称】
大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒
【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒 试剂盒用途】
定量大鼠血清、血浆及相关液体样本中地西泮结合抑制因子的含量
【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒检测原理】
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被地西泮结合抑制因子透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中地西泮结合抑制因子浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中地西泮结合抑制因子含量。
【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒 试剂盒组成】
| 1 |
| 酶标包被板 | 12孔×8条 | 7 | 底物夜A | 6mL |
| 2 |
| 标准品：200ng/ml | 0.6mL | 8 | 底物夜B | 6mL |
| 3 |
| 20倍浓缩洗涤液 | 20mL | 9 | 终止液 | 6mL |
| 4 |
| 标准品稀释液 | 6mL | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 |
| 样本稀释液 | 6mL | 11 | 封板膜 | 1张 |
| 6 |
| 酶标试剂 | 6mL | 12 | 密封袋 | 1个 |
备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml
【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒需要而未提供的试剂和器材】
1、37℃恒温箱
2、 标准规格酶标仪
3、 精密移液器及一次性吸头
4、 蒸馏水
5、 一次性试管
6、 吸水纸
【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒操作步骤】
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
7、温育：重复4的操作。
8、洗板：重复5的操作。
9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值（OD值）。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。*终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟
洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟
洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟
加入终止液
15分钟之内读OD值
计算
【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒检测范围】
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【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒规格】
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【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒贮藏】
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【大鼠地西泮结合抑制因子ELISA检测试剂盒有效期】
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原创作者：上海韵涵生物科技有限公司
