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腺病毒包装

点击次数:328发布时间:2012/3/30 10:57:11

腺病毒包装

更新日期:2012/3/30 10:57:11

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简单介绍:上海拜沃以质量为本,树立“拜沃质量”是公司的发展目标。我们一直加倍努力,竭尽做到不辜负您的支持与信赖。同时公司也离不开广大客户的帮助支持,真诚邀请国内外有实力的实验室、生物技术公司合作,共同发展。目前拜沃提供的服务范围包括:生物合成siRNA、shRNA的制备;转录编码shRNA的DNAs、转录编码shRNA的质粒载体订购;siRNA靶位的设计和实验选择分析;siRNA相关试剂和RNA技术相关产品的代理销售;重组病毒构建包装;基因蛋白表达、载体构建、多克隆抗体和单克隆抗体制备;多种细胞学服务;常用的分子生物学试剂、实验仪器、实验耗材销售等。 拜沃在分子生物学和免疫学实验技术,特别抗体制备技术方面同样具有丰富经验,提供快速、、性价比高的实验服务。

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详细内容

 

腺病毒包装
1 特点:
1
几乎可以感染所有类型的细胞。
2
可以获得复制缺陷型 (E1 E3 缺失的腺病毒。
3
病毒滴度高,产生病毒经过浓缩后可以达到1012 PFU/mL,能的进行增殖。
4
腺病毒载体感染宿主的范围比较广,制备容易,操作简单.
5
感染细胞时,不整合到染色体中,不存在激活致癌基因或插入突变等危险,生物安全性高。

2 原理:
腺病毒 (AdenovirusAd) 是一种无包膜的线状双链DNA 病毒,其复制不依赖于宿主细胞的分
裂。有近50 个血清型,大多数Ad 载体都是基于血清型2 5,通过转基因的方式取代E1 E3
因,降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1 E3 基因的细胞中复制,因此是一种
适用于治疗的控制系统。
3 腺病毒包装简要流程Invitrogen 包装系统为例
1
构建表达siRNA/miRNA 的腺病毒载体。
2
采用PacI 消化纯化的质粒。
3
消化好的腺病毒表达载体转染293A细胞,收获细胞以制备病毒粗提液。
4
将病毒粗提液感染293A细胞以扩增病毒。
5
分装,- 80 oC 保存。
6
滴度测定目的基因检定,并出具检测报告。

4 本公司提供的*终产品包括:
1
重组后的腺病毒载体质粒以及测序图谱。
2
产品无菌检测结果。
3
腺病毒储液及相应的病毒滴度。

我们:1) 制备的病毒颗粒携带片段的正确性2) 病毒颗粒的总数和病毒滴度:如无特殊要求我们
提供1mL 滴度为1×1010 - 1×1012 个病毒基因组 / mL 的病毒储液

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