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腺病毒包装
1 特点:
1)几乎可以感染所有类型的细胞。
2)可以获得复制缺陷型 (E1 和E3 缺失) 的腺病毒。
3)病毒滴度高,产生病毒经过浓缩后可以达到1012 PFU/mL,能的进行增殖。
4)腺病毒载体感染宿主的范围比较广,制备容易,操作简单.
5)感染细胞时,不整合到染色体中,不存在激活致癌基因或插入突变等危险,生物安全性高。
1)几乎可以感染所有类型的细胞。
2)可以获得复制缺陷型 (E1 和E3 缺失) 的腺病毒。
3)病毒滴度高,产生病毒经过浓缩后可以达到1012 PFU/mL,能的进行增殖。
4)腺病毒载体感染宿主的范围比较广,制备容易,操作简单.
5)感染细胞时,不整合到染色体中,不存在激活致癌基因或插入突变等危险,生物安全性高。
2 原理:
腺病毒 (Adenovirus,Ad) 是一种无包膜的线状双链DNA 病毒,其复制不依赖于宿主细胞的分
裂。有近50 个血清型,大多数Ad 载体都是基于血清型2 和5,通过转基因的方式取代E1 和E3 基
因,降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1 和E3 基因的细胞中复制,因此是一种
适用于治疗的控制系统。
3 腺病毒包装简要流程 (以Invitrogen 包装系统为例)
1)构建表达siRNA/miRNA 的腺病毒载体。
2)采用PacI 消化纯化的质粒。
3)消化好的腺病毒表达载体转染293A细胞,收获细胞以制备病毒粗提液。
4)将病毒粗提液感染293A细胞以扩增病毒。
5)分装,- 80 oC 保存。
6)滴度测定目的基因检定,并出具检测报告。
4 本公司提供的*终产品包括:
1)重组后的腺病毒载体质粒以及测序图谱。
2)产品无菌检测结果。
3)腺病毒储液及相应的病毒滴度。
我们:1) 制备的病毒颗粒携带片段的正确性2) 病毒颗粒的总数和病毒滴度:如无特殊要求我们
提供1mL 滴度为1×1010 - 1×1012 个病毒基因组 / mL 的病毒储液。
详情请登入:www.biovol.net