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上海邦奕为您提供如何进行ELISA实验
点击次数：686 发布时间：2012/7/4
如何进行ELISA实验
确定实验动物和ELISA检测指标
- 查找文献，根据临床意义，确定要用的实验动物（如大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、狗等）和用ELISA方法检测的实验指标（如白介素，生长因子，激素等）；
确定要搜集的标本类型
- 确定要搜集的标本类型，如血清、抗凝血浆、肺泡灌洗液、脑脊液、尿液、关节华液、组织匀浆、细胞培养上清液等；
确定要收集的标本数量
- 合理分组，根据实验模型，确定要收集的标本数量；
确定购买试剂盒的厂家和试剂盒特点
- 根据标本数量，确定要购买的试剂盒的规格和数量；确认适用于要检测的标本的相应规格的ELISA试剂盒的灵敏度、检测范围、价格和到货期等情况；了解试剂盒的整盒有效期和拆开包装後的有效期（各主要成分的开瓶有效期）；
- 复孔：为了增加结果的可靠性，对标准曲线和标本，要求做双复孔或者三复孔，就是同一份标本，平行做两次或者三次。
如果本身试剂盒的稳定性好，而又不要求每个数据的绝对准确，主要目的是为了统计学意义的话，可以选择做双复孔或者是单孔。
确定时间的合理安排
- 确定标本的采集时间；根据采集时间来安排标本的保存条件、何时进行试剂盒的购买、如何进行预实验的安排、如何进行大批量标本的检测；
- 如果标本采集时间过长，如超过六个月，请把标本放在-70度或者液氮罐中保存；在基本上收集完标本的前一个月，进行试剂定购。一般国外 试剂的到货期*长一个月，有足够的时间来等待试剂盒的来到。到货後，取几个样品（*少两个，估计的低值和高值）和标准品来进行预实验。预实验成功後才能进 行大批量标本的实验。
- 因为每个试剂盒可能都经过长途运输，所以预实验是必不可少的，这样才能保证试剂盒没有问题，而且一旦有问题可以很快速的得到解决，且不用浪费自己辛苦收集的标本。
