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石蜡包埋组织microRNA快速提取试剂盒（离心柱型）
点击次数：235 发布时间：2016/8/29 14:24:42
一、原理简介
改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活 RNA 酶，然后总 RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，*后低盐的 RNasefree water 将纯净 RNA（microRNA）从硅基质膜上洗脱。
二、试剂盒特点
1． 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2． 结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA 可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3． 独有的 MRL 裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。
4． 多次漂洗去蛋白过程，提取 RNA 纯度更高。
三、注意事项（实验前必须首先阅读这部分！）
1． 为防止RNA降解，所有离心步骤如未加说明，均在4℃低温进行。使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf5415C 或者类似离心机。
2． 裂解液 MRL 中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3． 预防 RNase 污染，在实际的操作中应遵循以下指南（参见《分子克隆》）* 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌，可能污染RNA的抽提并成为RNA酶的来源。培养良好的微生物实验操作习惯预防微生物污染。* 使用灭菌的、一次性的塑料器皿和自动吸管抽提RNA，避免使用公共仪器所导致的RNA酶交叉污染。* 使用无 RNA 酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在 150°C 的烘箱中烘烤 4 小时，塑料器皿可以在 0.5 M NaOH 中浸泡 10 分钟，用水彻底漂洗干净后高压灭菌备用。
4． 考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂，用户使用前需要自备。
5． 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析大 RNA 的质量。好的 RNA 产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体 RNA 带，分别为~5Kb（28S），~2Kb（18S），条带亮度比值约为 2：1。
6． 检测 OD260/OD280吸光度比值时，RNA 样品应该溶于 TE 后检测，如果用水稀释后检测，由于一般水离子强度和 PH 值低，会使 OD280升高，从而使比值降低。
7． 加入裂解液 MRL 匀浆后，加前，样品可在 –60℃-70℃ 保存一个月以上。
五、操作步骤
详细信息请咨询客服，索要产品详细说明书。QQ：
原创作者：上海亨代劳生物有限公司
