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硝酸盐还原实验试剂分析法
肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐，硝酸盐还原反应包括两个过程：1、在合成
过程中，硝酸盐还原为亚硝酸盐和氨，再由氨转化氨基酸和细胞内其他含氮化合物；在分解
代谢过程中，硝酸盐戒亚硝酸盐代替氧作为呼吸酶系统中的终末受氢体。能使硝酸盐还原的
细菌从硝酸盐中获得氧而形成亚硝酸盐和其他还原性产物。
硝酸盐还原实验试剂主要由对氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液组成，主要用于
鉴别肠杆菌、假单胞菌等。大肠埃希菌等细菌仅能使硝酸盐还原为亚硝酸盐，亚硝酸盐与乙
酸作用生成亚硝酸，亚硝酸盐与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸，后者与α-
萘胺结合生成红色产物；假单胞菌、沙雷菌等细菌能使硝酸盐戒亚硝酸盐还原为氮戒氧化氮，
该作用被称为脱硝化戒脱氮化作用，产生气泡，但无红色出现。
产品组成：
| 试剂(A): 对氨基苯磺酸溶液 | 50ml | RT 避光 |
| 试剂(B): α-萘胺溶液 | 50ml | RT 避光 |
| 试剂(C): 锌粉 | 5g | RT |
| 使用说明书 | 1份 | |
自备材料：
1、 硝酸盐培养基
2、 恒温培养箱
3、 试管
操作步骤 (仅供参考) ：
1、 被检细菌接种于硝酸盐培养基，35℃培养 1～4 天。
2、 取适量的对氨基苯磺酸溶液和α-萘胺溶液等量混合后即为硝酸盐还原实验试剂。
3、 取 0.1ml 硝酸盐还原实验试剂，加入培养基中，立即观察结果。
4、 如果实验呈阴性反应，在试管中加入少许锌粉，立即观察结果。
染色结果：
| 未加锌粉呈红色 | 阳性(肠杆菌科细菌、韦荣球菌) |
| 加锌粉呈红色 | 阴性 |
| 加锌粉不变色 | 假阴性(假单胞菌、沙雷菌等) |
注意：加入试剂无颜色反应，可能原因：1、硝酸盐没有被还原，实验确为阴性；2、硝酸盐被还原为氨和氮等其他物质，迚而导致假阴性。这时可加入少许锌粉，如出现红色则说明实验确为阴性，如果未出现红色则说明实验为假阴性。
注意事项：
1、 如果要检查是否有氮气产生，可在培养管内加一个小倒管，看有无气泡产生。
2、 取细菌培养和实验中，应注意自我防护。
3、 待检细菌培养时间也会影响染色，阳性菌培养时间过长戒已死亜戒细菌溶解，都常呈阴
性反应。
4、 某些厌氧菌(韦荣球菌)亦呈阳性反应。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12 个月有效。
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原创作者：上海亨代劳生物有限公司
