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β—半乳糖苷酶标记试剂

点击次数:409 发布时间:2012/9/20 9:10:19

β—半乳糖苷酶已被广泛用于酶标记免疫分析,但主要用于免疫细胞化学。一种较好的底物是5—溴—4—氯—3—吲哚—β—D—吡喃型半乳糖苷(BCIG),它可以产生一种深蓝色的产物。此产物在乙醇和水中稳定,不溶解。

 
    1.需要的溶液、试剂和特殊设备
    BCIG;
    N,N—二甲基甲酰胺;
    1mmol/LMgCl2;
    3mmol/L亚铁用PBS溶解,DPX。
    光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。
 
    2.操作步骤
    (1)用0.1mlDMF溶解4.9mgBCIG。
    (2)加0.1mlBCIG溶液至10ml含有1 mmol/L MgCl2 3retool/L亚铁的PBS中。
    (3)滤纸过滤。
    (4)加此溶液至标本,在室温孵育10~40min,用水冲洗终止反应。
    (5)优化:如果需要,进行复染。
    (6)用DPX封片。

原创作者:上海金穗生物科技有限公司

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