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加压蒸煮处理以暴露被掩盖的抗原表位
点击次数：430 发布时间：2012/10/8 9:52:05
使用加压蒸煮器的原理与微波炉相似。持续加热可以破坏某些阻碍抗体进入的亚细胞结构。此法适宜于处理玻片上的样品。加压蒸煮器的主要优点是具有同时处理大量玻片的能力，并且便于使用金属支架，以避免微波炉过热。
1．所需试剂和特殊设备
1．0retool／IEDTA（pH8．0）；PBS。
加压蒸煮器。
2．操作步骤
（1）将标本片或样品放入支架或其他适宜的容器中。石蜡包埋样品的切片应脱蜡和再水化（见石蜡组织切片步骤7和8）。
（2）悬于1．0mmol／LEDTA（用氢氧化钠调节pH值至8．0）中，于室温下孵育样品10min，其间摇动数次。
加热修复抗原传统的使用缓冲液是10mmol／L柠檬酸钠；新近有报道用EDTA缓冲液的效果更
（3）向不锈钢加压蒸煮器中加入EDTA溶液至1／3处。在热皿上加热至沸腾。
（4）将标本片浸入缓冲液中，然后密封加压蒸煮器。
（5）压力可以升至。*多持续2min。
（6）从热源上取下。在自来水中冷却加压蒸煮器。
（7）打开加压蒸煮器，取出标本片，用PBS洗2次。
至此，准备就绪的样品可加入抗体染色。
原创作者：上海金穗生物科技有限公司
