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大肠杆菌的电转化和噬菌体的繁殖
1．在冰上冷却纯化后的DNA 和一个0．2cm宽的电转化杯。冰上解冻一个350u1的感受态大肠杆菌SS320，把DNA加入细胞并用微量移液器吹吸多次进行混合（避免引入气泡）。
2．把混合物转移入电转化杯进行电转化。按照厂家的说明进行电转化，优先使用一个带有下列配置的BTXECM-600电转化系统：2．5 kV电场强度，129 n电阻和50uF电容。作为替代，也可以使用带有以下配置的Bio-rad Gene Pulser：2．5 kV电场强度，200Ω电阻和25uF电容。
3．立即加入lmlSOC培养基保护电转化的细胞并转移到一个250ml带塞锥形瓶中。用 lmlSOC培养基清洗转化杯两次。将细胞加入SOC培养基至终体积25ml并且200r/ min 37℃孵育20分钟。
4．为判定文库的多样性，将一系列稀释液涂布于含有适当抗生素以筛选文库噬菌粒的 2YT/琼脂板（例如筛选臼-半乳糖苷酶编码的噬菌粒的羧苄青霉素）上。转移培养基到 装有500ml 2YT培养基的2L带塞锥形瓶中。培养基中补充有用于噬菌粒筛选的抗生 素（例如2YT/carb培养基）和M13K07辅助噬菌粒（终浓度为每毫升1010个噬菌 粒）。200r/min 37℃孵育过夜。
5．使用SorvallGSA转子（16000g）10000r/min 4℃离心培养基10分钟。转移上清至新 鲜的管子并加入1/5体积的PEG/NaCl溶液以沉淀噬菌粒。室温孵育5分钟。
6．使用GSA转子10000r/min 4℃离心10分钟，丢弃上清。用微量移液器简单清洗并清 除残余的上清。在1/20体积的PBS中重悬噬菌粒小球。使用SS-34转子（27000g） 15000r/rain 4℃离心5分钟缩聚不溶物质。转移上清到一个干净的管中。
7．利用吸光度值评估噬菌粒浓度（OD268＝1．0对应每毫升5*1012个噬菌粒）。
8．立即使用文库，或者-70℃保存。
