企业档案
- 会员类型：免费会员
- 工商认证： 【已认证】
- 最后认证时间：
- 法人：
- 注册号：****
- 企业类型：生产商
- 注册资金：人民币**万
微生物培养基类
- 肉及肉制品中庆大霉素残留量检验方法
- 乳与乳制品样品的制备与稀释
- 军团菌的检测方法
- 婴幼儿食品和乳品中生物素、维生素检测
- 欧洲药典（EP 7.0）
- 美国药典（USP）
- 中华人民共和国兽药典
- 中华人民共和国药典
- 国家消毒技术规范
- 致病性嗜水气单胞菌检验
- 阪崎肠杆菌检验
- 大肠埃希氏菌O157：H7/NM
- 乳酸菌检验
- 双歧杆菌检验
- 大肠菌群的快速检测
- 单核细胞增生李斯特氏菌检验
- 椰毒假单胞菌酵米面亚种检验
- 鲜乳中抗生素残留检验
- 霉菌和酵母菌计数
- 产气荚膜梭菌检验
- 肉毒梭菌及肉毒毒素检验
- 溶血性链球菌检验
- 空肠弯曲菌检验
- 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验
- 沙门氏菌检验
- 诊断血清
- 实验耗材
- 质控菌株
- 微生物检验原材料
- 其它生化鉴定管
- 乳酸菌
- 单核增生李斯特氏菌
- 志贺氏菌
- 沙门氏菌
- 克雷伯氏菌
- 大肠埃希氏菌
- 其它细菌
- 蜡样芽胞杆菌
- 酵母菌、霉菌
- 金黄色葡萄球菌
- 弧菌
- 大肠菌群
- 无菌检查
- 总数测定、细菌培养、样品制备
- 其它试剂
- 添加剂
- 其它细菌检测培养基
- 分子生物学试验用培养基
- 抗生素检验、药敏试验用培养基
- 淋病奈瑟菌
- 分枝杆菌
- 炭疽杆菌
- 鼠疫杆菌
- 支原体
- 军团菌
- 放线菌
- 芽孢杆菌（包括蜡样芽胞杆菌）
- 厌氧菌
- 乳酸菌、双歧杆菌
- 弯曲杆菌（包括空肠弯曲杆菌）
- 梭状芽胞杆菌（包括产气荚膜梭菌、肉毒梭菌）
- 真菌（包括霉菌、酵母菌）
- 气单胞菌
- 肠球菌、链球菌
- 小肠结肠炎耶尔森氏菌
- 弧菌（包括副溶血性弧菌、霍乱弧菌）
- 葡萄球菌（包括金黄色葡萄球菌）
- 李斯特氏菌
- 绿脓杆菌
- 沙门氏菌、志贺氏菌
- 阪崎肠杆菌
- 大肠埃希氏菌O157
- 大肠杆菌、大肠菌群、粪大肠菌群
- 细菌总数测定
- 细菌鉴定培养基
- 细菌增菌、培养
- 运送培养基
- 样品制备
- 显色培养基
- 植物组织培养基
- 疫苗培养基
动物血清
- 生物冰袋系列
- 裂解血系列
- 动物全血系列
- 小鼠血清系列
- 大鼠血清系列
- 豚鼠血清系列
- 兔血清系列
- 鸡血清系列
- 猪血清系列
- 绵羊血清系列
- 山羊血清系列
- 马血清系列
- 小牛血清系列
- 大牛血清系列
- 疫苗专用牛血清系列
- 新生牛血清系列
- 胎牛血清系列
抗体免疫类
中检所标准品
ELISA试剂盒
- 小鼠ELISA试剂盒
- 犬ELISA试剂盒
- 鸡ELISA试剂盒
- 猪ELISA试剂盒
- 豚鼠ELISA试剂盒
- 兔子ELISA试剂盒
- 植物ELISA试剂盒
- 绵羊ELISA试剂盒
- 仓鼠ELISA试剂盒
- 裸鼠ELISA试剂盒
- 猫ELISA试剂盒
- 马ELISA试剂盒
- 山羊ELISA试剂盒
- 鱼ELISA试剂盒
- 鸭ELISA试剂盒
- 猴ELISA试剂盒
- 牛ELISA试剂盒
- 其他ELISA试剂盒
- 大鼠ELISA试剂盒
- 人ELISA试剂盒
标准品
生物试剂
联系我们
联系人：李顺
技术文章
禽脑脊髓炎病毒（AEV）ELISA检测试剂盒说明书
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被禽脑脊髓炎病毒（AEV）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的禽脑脊髓炎病毒（AEV）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），判断样品是否含有禽脑脊髓炎病毒（AEV）。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 预处理后的样本无需稀释，直接取50μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 阴性对照 | 0.6mL | 0.6mL | 无 |
| 阳性对照 | 0.6mL | 0.6mL | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置阴、阳性对照孔和样本孔，阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照各50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；
4. 随后阴、阳性对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗原100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
1. 试验有效性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；
阴性对照孔OD值平均值≤0.15。
2. 临界值（Cut off）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
3. 阴性判断：样品OD值＜临界值（Cut off），样品为阴性
4. 阳性判断：样品OD值＞临界值（Cut off），样品为阳性
试剂盒性能
1. 准确性：阳性对照孔OD值平均值≥1.00；阴性对照孔OD值平均值≤0.15，说明试验结果有效。
2. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
4. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
5. 有效期：6个月
免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
原创作者：上海義森生物科技有限公司
