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大鼠新生甲状腺素,ELISA酶免分析检测试剂盒|ELISA Kit价格

点击次数:161发布时间:2013/5/4 13:39:32

大鼠新生甲状腺素,ELISA酶免分析检测试剂盒|ELISA Kit价格

更新日期:2021/11/5 13:03:36

所 在 地:中国大陆

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产品规格:96T/48T

应用范围:科研实验

产品用途:仅用于科学研究 不适用于诊断或治疗


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注意事项
1.所有试剂和样本使用前必须在室温下平衡,混匀试剂时不应起泡沫。
2.一旦实验开始,各操作步骤都应尽快完成。
3.避免重复使用手中的吸头和试管,以免交叉污染。
4.一般情况,酶的反应与时间和温度成正比。

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操作步骤
1.标准品的稀释:准备小试管6只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管
中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加
入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0号标准品。
稀释后各管浓度分别是:320 pg/ml,160 pg/ml,80 pg/ml,40 pg/ml,20pg/ml,0 pg/ml。
在酶标包被板上设标准品孔,依次加入不同浓度的标准品50ul(建议每个浓度做2个平行孔)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品、酶标试剂及生物素标记的抗IL-6抗体,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样
品孔中先加样品40μl,然后再加生物素标记的抗IL-6抗体10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行

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实验结果计算
  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;或用标准物的浓度与
OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,即为样品的实际浓度。

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