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大鼠S100B蛋白,ELISA酶免分析检测试剂盒|ELISA Kit价格

点击次数:220发布时间:2013/5/4 16:41:05

大鼠S100B蛋白,ELISA酶免分析检测试剂盒|ELISA Kit价格

更新日期:2021/11/5 13:23:34

所 在 地:中国大陆

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Elisa相关小常识:

用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

 

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Elisa实验常用方法:
双抗体夹心法测定抗原

将抗原免疫种动物获得的抗体吸附于固相表面;

加抗原,形成抗原-抗体复合物;

加抗原免疫第二种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物;

加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体);

加底物。底物的降解量=抗原量。

 

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Elisa实验原理:抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持它的免疫学活性;

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