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小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA Kit检测说明书
点击次数：330发布时间：2013/5/8 15:08:27
更新日期：2021/11/5 13:53:40
所 在 地：中国大陆
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小鼠D-乳酸脱氢酶（D-LDH）ELISA Kit检测说明书
根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法：
（一）双抗体夹心法：
双抗体夹心法：是检测抗原*常用的方法，操作步骤如下：
（1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。
（2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
（3）加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
（4）加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
小鼠D-乳酸脱氢酶（D-LDH）ELISA Kit检测说明书（二）双抗原夹心法测抗体：反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于间接法。乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备，应根据抗原结构的不同，寻找合适的标记方法。
小鼠D-乳酸脱氢酶（D-LDH）ELISA Kit检测说明书（三）间接法测抗体：间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体（抗人免疫球蛋白抗体）以检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法（见图2-3）。操作步骤如下：
（1）将特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。
（2）加稀释的受检血清，保温反应。血清中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体，血清中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
（3）加酶标抗抗体。可用酶标抗人Ig以检测总抗体，但一般多用酶标抗人IgG检测IgG抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量与标本中受检抗体的量正相关。
（4）加底物显色
小鼠D-乳酸脱氢酶（D-LDH）ELISA Kit检测说明书规 格：48T/96T
产品的用途：仅供科研ELISA检测试剂盒
检测的原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
标本的处理：
（1）细胞培养上清液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。
（2）脑脊液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。
（3）血浆
①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分钟，4℃，分离血浆样品，然后储存在零下80℃直到使用。
②用试剂盒中的标准稀释液5倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测，按照说明书指定方法检测。
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