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小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)ELISA Kit检测说明书
点击次数:686发布时间:2013/5/10 15:22:07
更新日期:2021/11/5 14:03:36
所 在 地:中国大陆
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小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)ELISA Kit检测说明书
组织样品前处理:
①1g组织切碎后加5倍体积的TBS,用均质器均质(10次)。 组织匀浆5000×g,4℃离心20分钟
TBS:50 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6, 150 mmol/L NaCl , 蛋白酶抑制剂 [0.1 mmol/L 二异丙基氟磷酸盐 , 0.5 mmol/L 苯甲磺酰氟 , 1 g/mL甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基酮盐酸盐, 1 g/mL抗痛素, 0.1 g/mL亮肽素]
②沉淀物悬浮与5倍体积的TBA/蛋白酶抑制剂(含1 mol/L蔗糖),5000×g,4℃离心20分钟。
③沉淀物中加入3倍体积的1%Triton X-100/TBS/蛋白酶抑制剂,匀质(10次)。37℃孵育15分钟后,5000×g离心20分钟。
④沉淀物和匀质物中加入3倍体积的2%SDS/TBS/蛋白酶抑制剂到。组织匀浆37℃孵育15分钟后,500000×g 25℃离心。
⑤沉淀物中加1mL 70%蚁酸到,超声破碎后5000×g 4℃离心
⑥收集上清液并用离心浓缩(Speed Vac)干燥。加100μL DMSO并短时超声破碎成悬液。零下80℃储存这个DMSO-蚁酸溶解的改组织溶液直到使用。
⑦检测时,依照说明书所写,用试剂盒中的标准稀释液溶解样本。
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小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)ELISA Kit检测说明书
Elisa试剂盒组成:
1、30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶 7、终止液6ml×1瓶
2、酶标试剂6ml×1瓶 8、标准品(800ng/L)0.5ml×1瓶
3、酶标包被板12孔×8条 9、标准品稀释液1.5ml×1瓶
4、样品稀释液6ml×1瓶 10、说明书1份
5、显色剂A液6ml×1瓶 11、封板膜2张
6、显色剂B液6ml×1瓶 12、密封袋1个