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小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(snRNP/Sm)ELISA试剂盒kit代测实验方法
点击次数：255发布时间：2013/6/8 11:57:37
更新日期：2021/11/5 14:23:38
所 在 地：中国大陆
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小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体（snRNP/Sm）elisa试剂盒kit代测实验方法
AP的底物
AP为磷酸酯酶，一般采用对硝基苯磷酸酯（p-nitrophenyl phosphate,p-NPP）作为底物，可制成片剂，使用方便。产物为黄色的对硝基酚，在405nm波长处有吸收峰。用NaOH终止酶反应后，黄色可稳定一时间。
AP也有发荧光底物（磷酸4-甲基伞酮），可用于ELISA作荧光测定，敏感度较高于用显色底物的比色法。
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洗涤液
在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水。
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酶反应终止液
常用的HRP反应终止液为硫酸，其浓度按加量及比色液的*终体积而异，在板式ELISA中一般采用2mol/L。
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体（snRNP/Sm）ELISA试剂盒kit代测实验方法
阳性对照品和阴性对照品
阳性对照品（positive control）和阴性对照品（negative control）是检验试验有效性的控制品，同时也作为判断结果的对照，因此对照品，特别是阳性对照品的基本组成应尽量与检测标本的组成相一致。以人血清为标本的测定，对照品也为人血清，因为正常人血清在各种ELISA模式中可产生不同程度的本底。由于大量正常人血甭较难得到，国外试剂盒中的对照品多以复钙人血浆（recalcified human plasma）为原料，即在血浆中加入钙离子，使其中的纤维蛋白质凝固，除去凝块后所得的液体，其组成与血清相似。阴性对照品须先行检测，确定其中不含待测物质。例如HBsAg检测的阴性对照品中不可含HBsAg，抗HBs也是阴性。阳性对照品多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质，其中加入一定量的待检物质，此量在试剂说明书中标明。加入的量应与试剂的敏感度相称，在测定中得到的吸光值与受检标本吸光值比较，可对标本中受检物质的量有一个粗略的估计。国外检测HBsAg的ELISA试剂盒检测敏感度约为0.5ng/ml，阳性对照品中含量约为10ng/ml。在对照品中一般加入抗生素和防腐剂，以利保存。
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