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科研抗体-Anti-ACE1( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管紧张素转换酶抗体
点击次数:331发布时间:2013/2/25 14:07:22
更新日期:2024/10/16 15:56:29
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Anti-ACE1( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管紧张素转换酶抗体
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Anti-ACE1( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管紧张素转换酶抗体>噬菌体抗体库技术
总体可概括为二个方面
(一)基本程序和原理 。噬菌体抗体库技术的原理,简言之就是用PCR技术从人免疫细胞中扩增出整套的抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,克隆到噬菌体载体上并以融合蛋白的形式表达在其外壳表面。这样一来噬菌体DNA中有抗体基因的存在,同时在其表面又有抗体分子的表达,就可以方便地利用抗原—抗体特异性结合而筛选出所需要的抗体,并进行克隆扩增。使抗体基因以分泌的方式表达,则可获得可溶性的抗体片段。在建库过程中如果将VH和VI。随机组合,则可建成组合抗体文库;如果抗体mRNA来源于未经免疫的正常人,则可以在不需要细胞融合的情况下建立起人天然抗体库。
(二)噬菌体抗体库技术的特点,可细分为三点
1.模拟天然全套抗体库 抗体文库可以达到或超过1011库容,所以能包含B细胞全部克隆。建库的外源基因来自人体外周血,骨髓或脾脏的淋巴细胞提取的mmDNA,mmDNA反转录形成cDNA,这些mRNA是人体多克隆细胞的总mRNA。使用的通用引物采自多个人体,具有人的种属普遍性。抗体的VH和VL基因的随机重组也增加了抗体的多样性。
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