新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

 

产品名称

新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）

管理类别

第三类

型号规格

50人份/盒；96人份/盒。

结构及组成/主要组成成分

核酸扩增反应液、酶混合液、ORF1ab/N反应液、阳性对照、阴性对照。（具体内容详见产品说明书）

适用范围/预期用途

本试剂盒用于体外定性检测新型冠状病毒肺炎疑似病例、聚集性病例、其他需要进行新型冠状病毒感染诊断或鉴别诊断者的口咽拭子、痰液样本中，新型冠状病毒（2019-nCoV）ORF1ab和N基因。

产品储存条件及有效期

避光-20±5℃储存，有效期9个月。

 

（一）新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）备注

请注册人在产品上市后继续完成以下工作： 1.本产品仅为新型冠状病毒（2019-nCoV）感染的肺炎的辅助诊断及应急储备，注册证有效期为一年。2.延续注册时应按照如下要求提交临床应用数据的总结报告：应在三家以上临床医疗机构（包括各疾病预防控制中心）收集该产品连续临床应用数据。临床应用数据应具有完善的信息，样本量符合统计学要求，签字盖章符合要求。3.企业应当在延续注册时按照体外诊断试剂注册管理办法的要求完善所有注册申报资料。

 

 

 

（二）新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）适用的受检人群

新型冠状病毒感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者、其他需要进行新型冠状病毒感染诊断的人员。

检测方法

常用的核酸特异基因检测法主要有（RNA恒温扩增-金探针层析法）和实时荧光逆转录PCR(聚合酶链式反应)法(实时荧光RT-PCR)。

1．RNA恒温扩增-金探针层析法

采集咽拭子标本，对标本中的脱落细胞进行裂解，裂解释放出的病原体RNA在逆转录酶和T7 RNA聚合酶的作用下，经过逆转录和转录过程，实现病毒RNA的T7核酸扩增。扩增产物加入30ul新型冠状病毒检查液中，与特异探针杂交，后，将混合液全部滴加至检测卡样孔内，通过层析显色读取结果。

2. 实时荧光PCR

实时荧光PCR是一种快速简便、成本较低、且已在临床广泛使用的感染性病原体核酸检测技术。新型冠状病毒2019-nCov属RNA病毒，PCR扩增需要行逆转录反应(RT)，商品化试剂盒通常把RT反应液与PCR反应液预混在一起，一次性完成逆转录和扩增检测的全部过程，操作简便且明显降低逆转录后开盖易导致污染的风险。（以下介绍核酸检测以荧光PCR法为主进行相关阐述）

 

 

（三）新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）检测原理

所有生物除朊病毒外都含有核酸，核酸包括脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），新型冠状病毒是一种仅含有RNA的病毒，病毒中特异性RNA序列是区分该病毒与其它病原体的标志物。新型冠状病毒出现后，针对新型冠状病毒进行全基因组序列的解析，并通过与其它物种的基因组序列对比，发现了新型冠状病毒中的特异核酸序列。临床实验室检测过程中，如果能在患者样本中检测到新型冠状病毒的特异核酸序列，那么就可以认为样本中存在病毒(已经感染)，应提示该患者可能被新型冠状病毒感染。反之表明样本中没有病毒(未感染)。

 

（四）新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）检测流程

因为新型冠状病毒的高传染性，目临床上都会对样本先灭活再检测，并且灭活方式多样，可以依据产品的情况采用加热的方式进行灭活，也可以直接放入带有灭活成份保存液中。

样本采集

根据试剂盒说明书“样本要求”部分进行样本采集，常规的样本类型包括(口)咽拭子、鼻(咽)拭子、痰液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液或其他呼吸道分泌物等样本。由于新型冠状病毒为RNA病毒，RNA易降解，因此采集样本时应使用无RNA酶的拭子和无RNA酶的储存管。

2. 样本保存、转运

获得患者样本后，需尽快进行检测。如无法立即检测需要转运，应按照说明书对样本进行低温封装，并尽快送到门的检测机构进行检测。

样本核酸的提取

检测机构收到样本后，对样本进行核酸提取，核酸提取试剂应使用批准产品说明书中的核酸提取试剂盒。

4. 样本检测

病毒RNA需要先逆转录为cDNA，再进行扩增检测。PCR扩增和检测应使用批准产品说明书中的荧光定量PCR仪，通过荧光定量PCR所得到的样本Ct值的大小，可以判断患者样本中是否含有新型冠状病毒。