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英文名称:T4 DNA Ligase
CAS号:9015-85-4
分子量:55.3kDa,单体
级别: BR
来源:含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
浓度:30Weiss u/ul(6000CEU/ul)
活性定义:是指在ATP-PPi交换反应中,37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量(weiss单位,1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位:20ul反应体系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量)
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液组分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase缓冲液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
抑制剂:当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时,可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意:T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率,为避免此现象,电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下:样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存;转化时,连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%;电转化之前,先用lvfang抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase,然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制:测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测:粘性末端或平末端DNA的连接能力
性状:液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP
用途:生化研究。粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性
保存: -20°C
IUPAC对化学标准物质的分类为:
A级:原子量标准。
B级:和A 级*接近的基准物质。
C级:含量为100+-0.02%的标准试剂
D级:含量为100+-0.05%的标准试剂
E级:以C级或D级为标准对比测定得到的纯度的试剂
化学试剂按用途可分为标准试剂,一般试剂,生化试剂等等。
我国习惯将相当于IUPAC 的C级、D级的试剂称为标准试剂。
“T4 DNA连接酶”订购优势:
全:公司提供上万种产品,涵盖了生物试剂,elisa试剂盒,标准品,培养基,原装耗材,抗体、培养基、ATCC细胞等,基本上各种科研所需产品在我司都能找到。
新:产品更新速度较快,基本上每周都有新产品出现。
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好:我公司具有优质的技术团队,产品一旦售出,实验过程中遇到困难可提供在线技术咨询。使您使用产品时没有任何的后顾之忧。
储存条件:
避光、干燥阴凉处封闭贮存,严禁与有毒、有害物品混放、混运。本品为非危险 产品可按一般化学品运输,轻搬动轻放,防止日晒、雨淋!受热、受潮、受光后易丧失活力,保存期短,因此贮存和运输条件比较苛刻。
“T4 DNA连接酶”使用注意事项:
1、虽然本试剂在有效期过后很长一段时间仍可以使用,但还是强烈建议您在管体规定的有效期内正确使用。
2、请不要在脏乱和强光环境中取用,以免造成污染和失效。
3、如果一次使用很少可以将其适当分装后使用,这样可以有效的防止试剂污染。
公司年末热销产品:
品名
D-亮氨醇/(R)-2-氨基-4-甲基-1-戊醇/(R)-(?)-Leucinol
BOC-L-天冬酰胺/N-叔丁氧羰基-L-天冬酰胺/BOC-L-天门冬酰胺/N-BOC-L-天冬酰氨酸/Boc-L-asparagine
BOC-D-天冬酰胺/N-叔丁氧羰基-D-天冬酰胺/BOC-D-天门冬酰胺/Boc-D-asparagine
BOC-L-天冬氨酸/ N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸/BOC-L-天门冬氨酸/Boc-Asp-OH
BOC-D-天冬氨酸/N-叔丁氧羰基-D-天冬氨酸/BOC-D-天门冬氨酸/Boc-D-Asp-OH