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ELISA手工检测过程复杂,影响因素较多,即使室内质控在控,也可能因孔间差异而造成结果的差异,因此加大复查力度是保证结果准确性的可靠方法,可疑、弱阳性标本及少见模式的检测结果进行复查。
“人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)ELISA试剂盒”标本收集:
1.收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆抗凝剂推荐使用EDTA。避免使用溶血,高血脂标本。
3.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
4.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃,-70℃电冰箱内,避免反复冻融,3-6月内检测。
二、试剂盒说明
1. 在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,个孔与*后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。
3. 试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。
4. 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
5. 刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
6. 中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
7. 所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8. 有效期:6个月
三、“人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)ELISA试剂盒”特点
1.一般有两种金标二抗,配Goat-anti-Rabbit和Goat-anti-Mouse抗体
2.精细纯化并经过预吸附的抗体
3.同rabbit 和mouse的单抗和多抗一起使用
4.很低的背景
5.电镜级别,非常适于电镜下的单标或者双标
计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
四、实验前的准备
1.要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
2. “人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)ELISA试剂盒”实验时,要使底物避光保存。
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