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ELISA手工检测过程复杂,影响因素较多,即使室内质控在控,也可能因孔间差异而造成结果的差异,因此加大复查力度是保证结果准确性的可靠方法,可疑、弱阳性标本及少见模式的检测结果进行复查。
“人膜辅蛋白(MCP/CD46)ELISA试剂盒”标本收集:
1.收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆抗凝剂推荐使用EDTA。避免使用溶血,高血脂标本。
3.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
4.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃,-70℃电冰箱内,避免反复冻融,3-6月内检测。
二、标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 样本处理:血清或血浆标本推荐稀释10,000倍。
注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
三、“人膜辅蛋白(MCP/CD46)ELISA试剂盒”特点
1.一般有两种金标二抗,配Goat-anti-Rabbit和Goat-anti-Mouse抗体
2.精细纯化并经过预吸附的抗体
3.同rabbit 和mouse的单抗和多抗一起使用
4.很低的背景
5.电镜级别,非常适于电镜下的单标或者双标
计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
四、实验前的准备
1.要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
2. “人膜辅蛋白(MCP/CD46)ELISA试剂盒”实验时,要使底物避光保存。
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