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小鼠β萘酚(β-naphthol)ELISA试剂盒
点击次数:119发布时间:2015/3/12 20:50:32
更新日期:2019/4/3 17:18:53
所 在 地:美洲
产品型号:
品牌名称:TSZ
优质供应
详细内容
ELISA手工检测过程复杂,影响因素较多,即使室内质控在控,也可能因孔间差异而造成结果的差异,因此加大复查力度是保证结果准确性的可靠方法,可疑、弱阳性标本及少见模式的检测结果进行复查。
“小鼠β萘酚(β-naphthol)ELISA试剂盒”标本收集:
1.收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆抗凝剂推荐使用EDTA。避免使用溶血,高血脂标本。
3.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
4.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃,-70℃电冰箱内,避免反复冻融,3-6月内检测。
二、如何降低试剂盒背景的步骤
大家都知道Elisa背景太高,会导致试剂盒检测失败,那么背景过高,而您怀疑洗涤不够时,根据我司多年经验。可以尝试增加洗涤次数。这种封锁液便宜、不乱,在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。假如浓渡过高,或者未准确稀释,则会导致高背景。常用的蛋白封锁液包括牛血清白蛋白(BSA)、脱脂奶粉、正常血清和鱼明胶。封锁液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜伏的结合位点。ELISA实验的原理好像很简朴,不过乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗涤和封锁。假如您的背景过高,怀疑封锁不充分,那么您可以尝试使用更高浓度的封锁液,或适当延长封锁时间。血清组分的内在多样性可使它有效拦截很多不同类型的分子相互作用。另一个选择是使用蛋白和非离子型去污剂这两种封锁液,后者可协助洗涤过程中的封锁。解决这个题目的一种方法是使用鸡或鱼的正常血清。好的封锁液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。在实验结束时,我们是否能获得有意义的信息,这在很大程度上取决于结果的信噪比。
假如您的ELISA不幸地碰到了高背景,那么也无需太担心,依次查看ELISA系统中的组分,并排除可能存在的题目。记住,非特异的抗体结合会增加背景。不外,它的缺点在于能与Protein A和IgG抗体相互作用。为了防止这一点,切勿使用过多的一抗或二抗。请勿使用高浓度(正常浓度为0.01-0.1%),它会降低特异结合,产生假阴性。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。目前主要有两种类型的封锁液:蛋白和非离子型去污剂。您当然也希望抗体只与目的蛋白结合吧。假如您一直被背景题目所困扰,那么也许您该花些时间来优化封锁液。
三、“小鼠β萘酚(β-naphthol)ELISA试剂盒”特点
1.一般有两种金标二抗,配Goat-anti-Rabbit和Goat-anti-Mouse抗体
2.精细纯化并经过预吸附的抗体
3.同rabbit 和mouse的单抗和多抗一起使用
4.很低的背景
5.电镜级别,非常适于电镜下的单标或者双标
计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
四、实验前的准备
1.要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
2. “小鼠β萘酚(β-naphthol)ELISA试剂盒”实验时,要使底物避光保存。
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