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各种类型ELISA测定时一般需经过这些步骤:固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。
1.重复某一样品时,加样时间尽可能与次接近。
2.加样后在混匀器上充分混匀。
二、ELISA试剂盒所需要样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右 (2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清 。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
三、“鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒”评价
1.灵敏度:①为试剂检出被检物质的量的能力;②为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
2.特异性、精密度、准确度、简便性、安全性。
3.经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理;
4.试剂评价:需要有权威的确证方法和确证的样品进行检测。
四、产品优势
1.产品种类齐全、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、易保存、操作简单;
2.发货及时;
3.免费提供ELISA试剂盒待测服务,上海拥有自己的实验和技术团队,公司为您提供全方位的售前、售中、售后技术支持,解决实验过程中遇到的问题;
4.免费提供产品*新报价、实验原理、产品用途及中英文说明书。
购买“鸡白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒”首先要注意有效期,尽量买刚出厂不久的。大家更多的了解试剂盒无非就是担心实验能否成功,试剂盒结果出来以后如何解释。只要是商品化试剂盒,都是比较稳定的,但一般检测抗原不如检测抗体准确度高。
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