《 中国药典》已有数个品种以有关物质 II 的检测项目形式收载了使
用球状亲水硅胶 SEC 的方法1。目市面上主要有两种类型的球
状亲水硅胶基质：键合二醇基的硅胶 (USP L20) 和键合亲水涂层
的硅胶 (USP L59)。较为传统的 USP L20 键合相由于存在较多的
残留硅醇基，通常需要较高离子强度的流动相以克服非特异性相
互作用。而 Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱（L59 型）采用聚合物
亲水涂层，残留硅醇基数目大幅减少，从而能够有效抑制非特异
性相互作用，实现聚集体的准确定量分析。此外，2.7 μm的填料
粒径以及更大的孔容设计，都有助于进一步提升色谱分离效果。
试剂和样品
无水磷酸二氢钠与十二水合磷酸氢二钠均购自 Sigma-Aldrich
公司。
实验用水取自 Merck Millipore Milli-Q 超纯水系统。
磷酸盐缓冲液：5 mmol/L Na2HPO4:5 mmol/L NaH2PO4 (61:39)。
所有样品均为实际样品。样品均为市购产品。样品溶解于流动相
后过 0.22 μm 滤膜。样品浓度均为 1 mg/mL。
仪器和设备
本实验采用 Agilent 1260 Infinity II 液相色谱系统，该系统配备二
管阵列检测器。所用色谱柱为 Agilent AdvanceBio SEC 130A,
7.8 × 300 mm, 2.7 Um（部件号：PL1180-5350）。
样品处理
准确称取 10 mg 抗生素粉末状样品于 10 mL 离心管内，加入流动
相 10 mL 后，超声 1 分钟。经 0.22 um 滤膜过滤后，取续滤液进
样分析。
色谱条件

色谱柱：AdvanceBio SEC 130A, 7.8 × 300 mm, 2.7 um（部件号：
PL1180-5350）
流动相：5 mmol/L 磷酸盐缓冲液（含 5% 乙腈），pH 7.0
进样量：5 uL
柱温：25 ℃
流速：0.6 mL/min
等度运行
检测波长：254 nm

部件号	说明	内径ID	长度L
PL1180-1301	AdvanceBio SEC 300A，7.8x50 mm, 2.7um，液相色谱保护柱	7.8	50 mm
PL1180-1350	AdvanceBio SEC 130A, 7.8×50 mm, 2.7um, LC guard column	7.8	50 mm
PL1180-3301	AdvanceBio SEC 300A, 7.8×150 mm, 2.7um, LC column	7.8	150 mm
PL1180-3350	AdvanceBio SEC 130A, 7.8×150 mm, 2.7um, LC column	7.8	150 mm
PL1180-530	AdvanceBio SEC 300A, 7.8×300 mm, 2.7um, LC column	7.8	300 mm
PL1180-5350	AdvanceBio SEC 130A，7.8×300 mm, 2.7um，液相色谱柱	7.8	300 mm
PL1580-1201	AdvanceBio SEC 200A, 4.6×30 mm, 1.9um
PL1580-1301	AdvanceBio SEC 300A, 4.6×50 mm, 2.7um, LC guard column	4.6	50 mm
PL1580-1350	AdvanceBio SEC 130A, 4.6×50 mm, 2.7um, LC guard column	4.6	50 mm
PL1580-3201	AdvanceBio SEC 200A, 4.6×150 mm, 1.9um, LC column
部件号	说明	内径ID	长度L
PL1580-3301	AdvanceBio SEC 300A, 4.6×150 mm, 2.7um	4.6	150 mm
PL1580-3350	AdvanceBio SEC 130A，4.6×150 mm, 2.7um，液相色谱柱	4.6	150 mm
PL1580-5201	AdvanceBio SEC 200A, 4.6×300 mm, 1.9um
PL1580-5301	AdvanceBio SEC 300A，4.6×300 mm, 2.7um，液相色谱柱	4.6	300 mm
PL1580-5350	AdvanceBio SEC 130A, 4.6×300 mm, 2.7um	4.6	300 mm