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腌制品(蜜钱)中人工合成色素的检测方法
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详细内容
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
仪器: LC-100液相色谱仪
试剂: 人工色素标液( 柠檬黄, 苋菜红, 胭脂红, 日落黄, 亮蓝) : 0.5 mg/mL, 国家标准物质中心提供; 诱惑红( 80%) : SIGMA- ALDRICH,Inc 提供; 聚酰胺粉: 100 目; 醋酸铵, 石油醚: ( 30- 60 ℃) ; 柠檬酸溶液:20 g/L; 甲醇- 甲酸溶液: ( 6∶4)V/V; 无水乙醇—氨水—水溶液: ( 7∶2∶1)V/V;甲醇( 色谱纯) ; 冰乙酸。所用试剂除甲醇外均为分析纯。
液相色谱配置订货信息:
序号 | 产品名称 | 规格型号 | 单位 | 数量 | 报价 |
上海伍丰液相色谱仪LC-100双泵配置 | 人民币 | ||||
1 | 高压恒流泵 | LC-P100PHP 性能介绍:采用双柱塞并联泵结构,双泵头交替输液。整体结构采用模块化设计。流量范围:0.001-9.999ml/min,设定步长:0.001ml/min。流量度:≤±0.06%(1.000ml/min,8.5Mpa,水,室温) 工作压力:42Mpa(0.001-9.999ml/min) | 台 | 2.0 | 26000.00 |
2 | 紫外可见检测器 | LC-UV100 性能介绍:全封闭集成微型分光技术设计的高灵敏、高稳定紫外-可见检测器。波长范围:190-680nm,光谱带宽:8nm,波长度:±0.5nm,波长重复性:±0.2nm | 台 | 1.0 | 34000.00 |
3 | 手动进样器 | 7725i (自动触发,带支架,含20ul定量环) | 套 | 1.0 | 7500.00 |
4 | 色谱操作软件 | WS100 (双通道全自动智能反控,内置式) | 套 | 1.0 | 6000.00 |
5 | 混合器 | C050303/LC-100 | 套 | 1.0 | 6000.00 |
6 | 液相色谱柱 | Diamonsil C18(II) 5μm, 4.6x250mm | 支 | 1.0 | 1900.00 |
7 | 平头注射器 | 100ul | 支 | 1.0 | 450.00 |
定量方法:外标法
1.3 样品处理
1.4 计算
X = C ×V ×1000
m ×1000
X ─ 试样中合成色素的含量, g/kg;
m ─ 样品质量, g;
V ─ 样品定容后的体积, mL;
C ─ 测定用样品液中合成色素的浓度, mg/mL
2 结果
2.1 标准曲线线性关系实验分别配制各组分浓度相等的混合标准系列, 浓度为0.01、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/mL ( 其中诱惑红的浓度折算80%) , 进样量20μL 进行液相色谱分析, 用峰面积与浓度进行线性回归。各自的特征光谱图如图1 所示,及各组分的出峰情况如图2 所示,线性方程及各自相关系数r 如表2 所示:表2! 各组分人工合成色素标准曲线回归方程及相关系数
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2.2 检测量
采用3 倍信噪比时所对应的浓度, 由此计算出检出量为: 柠檬黄1.4×10- 5 mg/mL, 苋菜红2.8×10- 5 mg/mL, 胭脂红2.8×10- 5 mg/mL, 日落黄3.0×10- 5 mg/mL, 诱惑红1.6×10- 5 mg/mL, 亮蓝6.0×10- 4 mg/mL。
2.3 回收率实验
将样品精密量取后, 分别加入一定量的混合标准溶液制成高、中、低3 个浓度的加标样品, 每个浓度取5 个
平行样品, 经前处理过滤后, 用HPLC 分析测得其回收率分别为柠檬黄: 93.7%~96.2%、苋菜红: 88.6%~95.4%、胭脂红: 90.3%~100.3%、日落黄: 94.3%~98.7%、诱惑红:94.8%~98.1%、亮蓝: 89.8%~94.4%( 见表3) 。
3 讨论
由于国标中关于合成色素的检测无腌(蜜钱)制品的处理方法, 故本文借鉴国标中对其他产品的处理方法, 又因柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝等人工合成色素均为水溶性, 依据相似相溶原理采用石油醚去除腌(蜜钱)制品中的油脂, 从而减少了因油脂堵塞G3 漏斗导致的抽滤不畅, 大大提高了色素的提取速度。同时也减少了样品中色素的损失。实现了腌(蜜钱)制品中6 种常用人工合成色素的同时快速检测。