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磷酸化p-IκB-α抗体/NFKBIA(Ser32/36)抗体促销
点击次数:280发布时间:2013/3/4 17:51:30
更新日期:2022/5/31 10:00:52
所 在 地:中国大陆
产品型号:
优质供应
详细内容
科研产品: 磷酸化p-IκB-α抗体/NFKBIA(Ser32/36)抗体促销
产品编号:BYk-2513R
产品规格: 0.1ml/0.2ml
产品价格:询价(电询或联系客服QQ)
抗体来源:Rabbit OR Mouse
产品用途:科研实验,相应的标记抗体有HRP标记抗体,FITC标记,BIO等。
性 状: Lyophilized or Liquid
浓 度: 1mg/1ml
亚 型: IgG
贮 存: 贮存于-20℃.
博研生物抗体售前、售中、售后免费技术服务,欢迎致电索说明书
Western-blotting试验方法:
蛋白提样品制备
1、 将培养液吸入至15 ml离心管中,于2500 rpm离心5 min。
2、 弃上清,加入5 ml PBS并用枪轻轻吹打洗涤,然后2500 rpm离心5 min。弃上清后用PBS重复洗涤一次。
3、 用枪吸干上清后,加100 μl裂解液(含PMSF)冰上裂解30 min,裂解过程中要经常弹一弹以使细胞充分裂解。
4、将裂解液4℃、12000 rpm离心5 min,取上清分装于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。
5、BCA法测蛋白浓度
磷酸化p-IκB-α抗体/NFKBIA(Ser32/36)抗体促销相关知识:
抗原修复——原因 *常规的石蜡切片标本均用甲醛固定,结果使得: -抗原性物质形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇; -蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。 *要求:在染色时,需要行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态抗原修复——方法 *化学方法 *加热方法 -水浴加热法 -微波照射法 -高压加热法 -酸水解法
抗体规律
(1)初次反应产生抗体:当抗原次进入机体时,需经一定的潜伏期才能产生抗体,且抗体产生的量也不多,在体内维持的时间也较短。 (2)再次反应产生抗体:当相同抗原第二次进入机体后,开始时,由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合,可使原有抗体量略为降低。随后,抗体效价迅速大量增加,可比初次反应产生的多几倍到几十倍,在体内留存的时间亦较长。 (3)回忆反应产生抗体:由抗原刺激机体产生的抗体,经过一定时间后可逐渐消失。此时若再次接触抗原,可使已消失的抗体快速上升。如再次刺激机体的抗原与初次相同,则称为特异性回忆反应;若与初次反应不同,则称为非特异性回忆反应。非特异性回忆反应引起的抗体的上升是暂时性的,短时间内即很快下降。
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免疫反应
1、将膜用TBS从下向上浸湿后,移至含有封闭液的平皿中,室温下脱色摇床上摇动封闭1 h。
2、将一抗用TBST稀释至适当浓度(在1.5 ml离心管中);将膜涂满一抗溶液后置于湿盒中,4℃孵育过夜,用TBST在室温下脱色摇床上洗两次,每次10 min;再用TBS洗一次,10 min。
3、同上方法准备二抗稀释液并与膜接触,室温下孵育1~2 h后,用TBST在室温下脱色摇床上洗两次,每次10 min;再用TBS洗一次,10 min,进行化学发光反应。
化学发光,显影,定影
将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合;1 min后,将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触;1 min后,将膜移至另一保鲜膜上,去尽残液,包好,放入X-光片夹中,曝光相应时间。冲洗胶片