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放射免疫分析基本原理
点击次数：1044 发布时间：2013/4/23
放射免疫分析基本原理
放射免疫分析（RIA）是以放射性核素作示踪剂的标记免疫分析方法，它具有的高度灵敏性、特异性和精确性等特点，特别适用于激素、多肽等含量微少物质的超微量分析。自20世纪50年代末首创以来，RIA被广泛地应用于生物医学的各个领域，极大地促进了相关学科的发展。1977年，其创始人美国学者Yalow也因此被授予诺贝尔医学奖。
经典RIA是采用标记抗原（Ag*）和非标记抗原（Ag）竞争性结合有限量特异性抗体（Ab）的反应，其反应式如图所示。
该反应体系中Ag*和Ag（标准抗原或待测抗原）具有等同的与Ab结合能力，可分别形成免疫复合物Ag*—Ab和Ag-Ab。当Ag*定量而Ab为限量，Ag*和Ag的化学量大于Ab的结合数目时。Ag*和Ag即通过竞争方式与Ab结合。随着Ag的增加则反应体系中Ag，分子与Ab结合的机会减少，形成Ag*Ab复合物以及测定时的放射量也降低。若以未结合的Ag*为F，Ag*—Ab复合物为B，则B／P或B／（B+F）与Ag的量变存在着函数关系。
RIA反应原理示意图
因此，RIA方法设计为用定量的Ag*、限量的Ab及一系列已知浓度的Ag（标准抗原）共同反应平衡后，将Ag*—Ab复合物（B）与游离的Agx（F）分离，测定各自放射性强度并计算出相应反应参数B／F比值或B／（B+F）结合率；以标准抗原浓度为横坐标，反应参数为纵坐标，绘制成剂量—反应曲线。待测样品在相同条件下进行反应，*后通过计算B／F或B／（B+F）反应参数，即可在该曲线上查得待测样本中抗原的含量。
